Perbedaan antara ELISA yang kompetitif dan tidak kompetitif

Itu perbedaan utama Antara ELISA yang kompetitif dan tidak kompetitif adalah itu ELISA kompetitif menggunakan antigen penghambatan sementara ELISA yang tidak kompetitif tidak menggunakan antigen penghambatan untuk pengujian.

Uji immunosorbent terkait enzim (ELISA) adalah uji imunologis yang mendeteksi berbagai target seperti antibodi, antigen, protein, dan glikoprotein. Ini adalah metode yang cepat dan sederhana untuk dilakukan. Oleh karena itu, lebih sering digunakan untuk penelitian dan tujuan diagnostik. ELISA melibatkan penggunaan enzim dan pengikatan antibodi dan antigen spesifik. Berdasarkan bagaimana reaksi terjadi, ada empat jenis ELISA: ELISA Langsung, ELISA Tidak Langsung, Sandwich ELISA, dan penghambatan ELISA. ELISA Langsung, Tidak Langsung, dan Sandwich adalah jenis ELISA yang tidak kompetitif sementara penghambatan ELISA adalah jenis ELISA yang lengkap. Tujuan utama artikel ini adalah untuk membahas perbedaan antara ELISA yang kompetitif dan tidak kompetitif.

ISI

1. Ikhtisar dan Perbedaan Utama
2. Apa itu ELISA yang kompetitif
3. Apa itu ELISA yang tidak kompetitif
4. Kesamaan antara ELISA yang kompetitif dan tidak kompetitif
5. Perbandingan berdampingan - ELISA kompetitif vs nonkompetitif dalam bentuk tabel
6. Ringkasan

Apa itu ELISA yang kompetitif?

ELISA kompetitif mengukur konsentrasi antigen dalam sampel melalui deteksi gangguan sinyal. Di sini, pengujian menggunakan antigen inhibitor. Oleh karena itu, ini adalah jenis penghambatan ELISA. Selama prosedur ini, antigen yang ada dalam sampel bersaing dengan antigen referensi yang dipilih untuk mengikat dengan jumlah antibodi berlabel tertentu. Selain itu, prosedur ini dimulai dengan inkubasi sampel, dengan jumlah berlebih dari antibodi berlabel. Juga, antigen referensi harus dilapisi sebelumnya pada pelat uji sumur ganda. Maka campuran sampel harus ditambahkan ke pelat uji yang berisi antigen referensi. Antibodi gratis akan mengikat antigen referensi tergantung pada jumlah antigen dalam sampel. Oleh karena itu, jika ada lebih banyak antigen sampel, lebih sedikit antigen referensi akan terdeteksi. Dengan demikian, itu menciptakan sinyal yang lebih lemah.

Gambar 01: Elisa

Sebaliknya, ketika sampel mengandung lebih sedikit antigen, semakin banyak antigen referensi akan menempati antibodi dan memberikan sinyal yang kuat. Karena ELISA yang kompetitif memberikan sinyal yang lebih kuat ketika sampel mengandung jumlah antigen yang rendah, ELISA kompetitif adalah uji yang sangat sensitif, bahkan untuk sampel dengan sejumlah kecil antigen.

Dalam beberapa kit ELISA yang kompetitif, antigen berlabel digunakan sebagai pengganti antibodi berlabel. Di sini, antigen berlabel dan antigen sampel akan bersaing untuk mengikat antibodi primer. Demikian pula, ketika jumlah antigen dalam sampel rendah, jumlah antigen berlabel yang berikatan dengan antibodi akan lebih tinggi dan membuat sinyal yang lebih kuat.

Apa itu ELISA yang tidak kompetitif?

Di antara empat jenis ELISA, tiga jenis adalah ELISA yang tidak kompetitif. Mereka adalah ELISA LANGSUNG, ELISA Tidak Langsung, dan Sandwich Elisa. Ketiga format bekerja di bawah prinsip umum ELISA dengan sedikit perbedaan dalam metodologi mereka.

Direct ELISA menggunakan enzim berlabel antibodi primer. Oleh karena itu, tidak memerlukan antibodi sekunder. Oleh karena itu, ELISA langsung lebih cepat daripada jenis ELISA lainnya. Antibodi primer akan secara langsung berikatan dengan antigen target yang diimobilisasi yang ada di piring. Oleh karena itu, reaksi enzim-substrat akan terjadi, menghasilkan sinyal yang terlihat.

Gambar 02: Sandwich Elisa

Tidak seperti ELISA langsung, ELISA tidak langsung menggunakan antibodi primer yang tidak berlabel dan enzim berlabel antibodi sekunder. Setelah antibodi primer berikatan dengan antigen yang diimobilisasi, antibodi sekunder berikatan dengan antibodi primer. Enzim dalam antibodi sekunder akan bereaksi dengan antigen dan menghasilkan sinyal yang terlihat. Sandwich Elisa berbeda dengan ELISA langsung dan tidak langsung. Di sini, antibodi diimobilisasi ke dinding pelat uji.

Apa kesamaan antara ELISA yang kompetitif dan tidak kompetitif?

• ELISA yang kompetitif dan tidak kompetitif adalah dua jenis teknik uji imunosorben.
• Mereka adalah teknik yang sangat fleksibel dan sensitif.
• Selain itu, ELISA kompetitif dan tidak kompetitif adalah immunoassay yang terkait dengan enzim.
• Juga, kedua metode menghasilkan sinyal karena reaksi enzim-substrat.

Apa perbedaan antara ELISA yang kompetitif dan tidak kompetitif?

ELISA kompetitif adalah jenis ELISA yang bergantung pada penyelesaian antara antigen analit dan antigen berlabel untuk jumlah antibodi spesifik yang terbatas. Di sisi lain, tidak ada persaingan seperti itu antara antigen yang menarik dan antigen referensi di ELISA yang tidak kompetitif. Dengan demikian, ini adalah perbedaan utama antara ELISA yang kompetitif dan tidak kompetitif. Demikian pula, ELISA yang kompetitif adalah ELISA penghambatan sementara ELISA yang tidak kompetitif bukanlah penghambatan ELISA. Jadi, ini juga perbedaan antara ELISA yang kompetitif dan tidak kompetitif.

Selain itu, ELISA yang kompetitif lebih cocok untuk mengukur jumlah antigen yang rendah. Itu adalah metode yang sensitif. Di sisi lain, ELISA yang tidak kompetitif tidak bergantung pada jumlah antigen yang ada dalam sampel. Oleh karena itu, ini juga perbedaan antara ELISA yang kompetitif dan tidak kompetitif.

Di bawah infografis menjelaskan perbedaan antara ELISA kompetitif dan nonkompetitif.

Ringkasan -ELISA kompetitif vs nonkompetitif

ELISA yang kompetitif dan tidak kompetitif adalah dua jenis utama ELISA atau tes immunosorben yang terkait dengan enzim. Dalam meringkas perbedaan antara ELISA yang kompetitif dan tidak kompetitif, ELISA kompetitif bergantung pada persaingan antara antigen yang menarik dan antigen referensi terhadap jumlah antibodi yang terbatas. Oleh karena itu, ELISA kompetitif juga dinamai sebagai penghambatan ELISA. Di sisi lain, ELISA yang tidak kompetitif tidak bergantung pada persaingan antara antigen target dan antigen referensi. Itu menggunakan kelebihan antibodi spesifik berlabel terhadap analit yang menarik. Dengan demikian, ini adalah perbedaan utama antara ELISA yang kompetitif dan tidak kompetitif. ELISA Langsung, ELISA Tidak Langsung, dan Sandwich Elisa adalah tiga jenis utama ELISA yang tidak kompetitif.

Referensi:

1. Bio-Rad. “Jenis ELISA | Bio-Rad."Bio, tersedia di sini.
2. “Empat jenis ELISA.”Cusabio Life Science - Mitra Ilmu Biologi Anda, Tersedia Di Sini.

Gambar milik:

"Elisa Tipus" oleh Carolfv333 - karya sendiri (CC BY -SA 4.0) Commons Wikimedia.
"Sandwich Immunoassay, Elisa" oleh Nickct - karya sendiri (CC BY -SA 3.0) Via Commons Wikimedia