Perbedaan antara fase terbalik dan fase normal HPLC

Itu perbedaan utama antara fase terbalik dan fase normal HPLC adalah bahwa Fase terbalik HPLC menggunakan fase stasioner nonpolar dan fase gerak polar sedangkan fase normal HPLC menggunakan fase stasioner polar dan fase gerak polar yang kurang.

HPLC fase normal adalah teknik tertua HPLC yang digunakan Tswett dalam pemisahan ekstrak tanaman; Dia menggunakan kapur di kolom kaca. Ini adalah mode kromatografi klasik yang menyebabkan menamainya sebagai teknik "normal". HPLC fase terbalik, di sisi lain, adalah kebalikan dari teknik normal, yang dikembangkan oleh para ilmuwan belakangan ini.

ISI

1. Ikhtisar dan Perbedaan Utama
2. Apa itu HPLC fase terbalik
3. Apa itu fase normal HPLC
4. Perbandingan berdampingan - Fase terbalik vs HPLC fase normal dalam bentuk tabel
5. Ringkasan

Apa itu HPLC fase terbalik?

HPLC fase terbalik adalah teknik kromatografi di mana kami menggunakan fase stasioner hidrofobik. Di antara semua metode HPLC, kami menggunakan metode ini sekitar 70% karena penerapannya yang luas, dan reproduktifitasnya. Fase stasioner adalah nonpolar dan fase gerak adalah polar.

Sebagian besar waktu, para ilmuwan menggunakan campuran air dengan pelarut organik kutub yang larut, seperti asetonitril atau metanol sebagai fase gerak. Oleh karena itu, analit berinteraksi dengan fase stasioner nonpolar.

Apa itu fase normal HPLC?

HPLC fase normal adalah teknik kromatografi di mana kami menggunakan fase stasioner hidrofilik. Ini adalah metode tradisional HPLC, meskipun kami tidak banyak menggunakannya. Fase stasioner adalah kutub, dan fase gerak adalah nonpolar. Lebih penting lagi, fase gerak teknik ini adalah 100% organik. Itu berarti tidak ada air yang digunakan untuk ini.

Gambar 01: Profil sampel untuk fase normal dan fase terbalik kromatogram HPLC sesuai dengan polaritas komponen dalam analit.

Biasanya, fase stasioner mengandung silika, cyano, diol, fase terikat amino, dll. Fase seluler termasuk pelarut organik seperti heksana, etil asetat, dll. Teknik ini basis pada retensi molekul pelarut atau analit ke fase stasioner kutub.

Apa perbedaan antara fase terbalik dan fase normal HPLC?

HPLC fase terbalik adalah teknik kromatografi di mana kami menggunakan fase stasioner hidrofobik. Fase stasioner dari teknik ini adalah nonpolar sedangkan fase gerak adalah polar. Selain itu, para ilmuwan menggunakan campuran air dengan pelarut organik polar yang larut, seperti asetonitril atau metanol sebagai fase gerak dalam fase terbalik HPLC. Sebaliknya, fase normal HPLC adalah teknik kromatografi di mana kami menggunakan fase stasioner hidrofilik. Fase stasioner dari teknik ini adalah polar sedangkan fase gerak adalah nonpolar. Selain itu, para ilmuwan menggunakan pelarut organik seperti heksana, etil asetat, dll. sebagai fase gerak HPLC fase normal. Infografis di bawah ini menyajikan perbedaan antara fase terbalik dan fase normal HPLC dalam bentuk tabel.

Ringkasan -Fase terbalik vs HPLC fase normal

Fase terbalik dan teknik HPLC fase normal adalah dua teknik kromatografi cair. Perbedaan utama antara fase terbalik dan fase normal HPLC adalah bahwa fase terbalik HPLC menggunakan fase stasioner nonpolar dan fase gerak polar sedangkan fase normal HPLC menggunakan fase stasioner polar dan fase gerak polar yang lebih sedikit.

Referensi:

1. Perairan. “Mode Pemisahan HPLC.”HPLC - Kromatografi Cair Kinerja Tinggi Dijelaskan: Perairan. Tersedia disini