Perbedaan antara uji BCA dan Bradford

Itu Perbedaan utama antara uji BCA dan Bradford adalah bahwa uji BCA memakan waktu dan kurang akurat, sedangkan uji Bradford cepat dan akurat.

Uji BCA dan Bradford adalah dua metode uji penentuan konsentrasi protein. Dua pengujian ini memiliki prinsip pengujian yang berbeda dan perbedaan dalam akurasi mereka.

ISI

1. Ikhtisar dan Perbedaan Utama
2. Apa itu uji BCA
3. Apa itu uji bradford
4. Uji BCA vs Bradford dalam bentuk tabel
5. Ringkasan - BCA vs Bradford Assay

Apa itu uji BCA?

Uji BCA atau Uji asam bicinchoninic adalah uji biokimia yang berguna dalam menentukan konsentrasi total protein dalam suatu larutan. Metode ini juga dinamai sebagai Smith Assay Setelah penemunya, Paul K. Smith. Metode analitik ini menunjukkan kesamaan dengan uji protein Lowry, uji protein bradford atau reagen biuret. Kita dapat mengamati konsentrasi protein total dalam sampel yang diberikan melalui perubahan warna larutan sampel, yang berubah dari hijau menjadi ungu. Perubahan warna ini terjadi secara proporsional dengan kandungan protein. Setelah itu kita dapat menggunakan teknik colourimetric untuk menganalisis intensitas warna dan kandungan protein dalam sampel.

Metode estimasi protein BCA

Saat mempertimbangkan mekanisme uji BCA, larutan BCA khas mengandung larutan yang sangat basa dengan pH hampir sekitar 11.25, dan bahan -bahan dalam larutan ini termasuk asam bicinchoninic, natrium karbonat, natrium bikarbonat, natrium tartrat, dan tembaga (II) sulfat pentahidrat. Uji ini terutama tergantung pada dua reaksi kimia: reduksi tembaga (II) menjadi tembaga (I) oleh ikatan peptida dalam protein dan chelation dari dua molekul asam bicinchoninic dengan ion tembaga (I), menghasilkan kompleks berwarna ungu yang bisa yang bisa ungu yang dapat dikompleks yang bisa berwarna ungu yang dapat berwarna ungu yang bisa berwarna ungu yang bisa berwarna ungu yang bisa berwarna ungu yang bisa berwarna ungu ungu menyerap cahaya pada panjang gelombang 562 nm. Dalam reaksi pertama, jumlah tembaga (II) dikurangi dengan ikatan peptida sebanding dengan jumlah protein dalam sampel.

Apa itu uji bradford?

Bradford Assay adalah metode analitik spektroskopi yang berguna dalam mengukur konsentrasi protein dalam suatu larutan. Metode ini dikembangkan oleh Marion M. Bradford pada tahun 1976, dan merupakan metode yang relatif cepat dan akurat.

Reaksi Warna Protein dan Pereaksi Bradford

Kita dapat menggunakan metode ini untuk menentukan konsentrasi jumlah protein dalam sampel. Reaksi kimia yang terjadi dalam sampel selama pengujian ini semata -mata tergantung pada komposisi asam amino protein dalam sampel.

Metode estimasi protein Bradford

Saat mempertimbangkan metode uji ini, ini adalah uji protein colourimetric yang didasarkan pada pergeseran absorbansi pewarna bernama Coomassie Brilliant Blue G-250. Secara umum, pewarna ini ada dalam tiga bentuk sebagai bentuk anionik (biru), bentuk netral (hijau) dan bentuk kationik (merah). Oleh karena itu, dalam kondisi asam, pewarna mengubah warnanya dari merah ke biru. Ini karena pengikatan protein dengan pewarna. Sebaliknya, jika tidak ada protein untuk mengikat dengan pewarna, perubahan warna tidak muncul, solusinya mendapatkan warna merah-coklat. Pewarna ini mampu membentuk kompleks yang kuat dan nonkovalen dengan gugus karboksil protein melalui gaya van der Waal dan atraksi elektrostatik.

Apa perbedaan antara uji BCA dan Bradford?

Uji BCA dan Bradford adalah dua metode uji penentuan konsentrasi protein. Dua pengujian ini memiliki prinsip pengujian yang berbeda dan perbedaan dalam akurasi mereka. Perbedaan utama antara uji BCA dan Bradford adalah bahwa uji BCA memakan waktu dan kurang akurat, sedangkan uji Bradford cepat dan akurat.

Infografis berikut merangkum perbedaan antara uji BCA dan Bradford dalam bentuk tabel.

Ringkasan -BCA vs Bradford Assay

Uji BCA atau uji asam bicinchoninic adalah uji biokimia yang berguna dalam menentukan konsentrasi total protein dalam suatu larutan. Bradford Assay adalah metode analitik spektroskopi yang berguna dalam mengukur konsentrasi protein dalam suatu larutan. Perbedaan utama antara uji BCA dan Bradford adalah bahwa BCA memakan waktu dan kurang akurat, sedangkan uji Bradford cepat dan akurat.

Referensi:

1. “Uji Protein Bradford.“Biosains Experimental, Rice University.

Gambar milik:

1. “Bradford Protein Assay” oleh Helito - Karya Sendiri (CC BY -SA 4.0) Via Commons Wikimedia
2. “BSA Standard Curve” oleh Alexieogo - karya sendiri (CC BY -SA 4.0) Via Commons Wikimedia