Itu perbedaan utama Antara BL21 dan DH5 Alpha adalah bahwa BL21 adalah kompeten yang direkayasa secara genetik protease secara genetika E. coli sel yang digunakan terutama untuk ekspresi protein, sedangkan dh5 alpha adalah kompeten yang direkayasa secara genetik E. coli sel dengan mutasi reca1 digunakan terutama untuk transformasi plasmid.
E. coli adalah salah satu organisme pilihan yang terkenal untuk produksi protein rekombinan. Itu telah menjadi platform ekspresi paling populer selama bertahun -tahun. Ini juga digunakan sebagai pabrik sel. BL21 dan DH5 Alpha adalah dua direkayasa secara genetik E. coli Sel yang saat ini digunakan untuk ekspresi protein dan transformasi plasmid, masing -masing.
1. Ikhtisar dan Perbedaan Utama
2. Apa itu bl21
3. Apa itu dh5 alpha
4. Kesamaan - BL21 dan DH5 Alpha
5. BL21 vs DH5 Alpha dalam bentuk tabel
6. Ringkasan - BL21 vs DH5 Alpha
BL21 adalah kompeten yang direkayasa secara genetik protease secara genetika E .coli sel terutama digunakan untuk ekspresi protein. E. coli BL21 adalah sel bakteri yang berasal dari strain B. Itu memiliki cacat protease lon dan membangkitkan protease membran luar. Ini biasanya digunakan untuk ekspresi protein rekombinan karena biasanya membawa stabilitas untuk protein yang diekspresikan. BL21 berguna untuk ekspresi protein dengan DNA PCOLD I-IV dan PCOLD TF DNA. Tapi ini kompeten E. coli Sel tidak dimaksudkan untuk sistem ekspresi protein menggunakan promotor T7 seperti sistem PET. Alasan di balik ini adalah BL21 tidak mengekspresikan T7 RNA polimerase. Selain itu, tidak disarankan untuk digunakan untuk konstruksi atau persiapan plasmid karena tidak memiliki mutasi reca.
Gambar 01: BL21
BL21 pertama kali dijelaskan oleh Studier pada tahun 1986 setelah berbagai modifikasi garis B. Sel BL21 kurang dalam lon protease, yang menurunkan banyak protein asing. Selain itu, tidak ada gen lain yang mengkode protease membran luar (OMPT) yang fungsinya adalah menurunkan protein ekstraseluler. Kurangnya protein ini memicu keberhasilan produksi protein asing E. coli Sel BL21. Selain itu, mutasi HSDSB dalam sel -sel ini mencegah metilasi dan gangguan DNA asing dalam sel BL21.
Dh5 alpha adalah kompeten yang direkayasa secara genetik E. coli sel dengan mutasi reca1 yang terutama digunakan untuk transformasi plasmid. DH5 Alpha E. coli Sel secara genetik direkayasa oleh ahli biologi Amerika Douglas Hanahan untuk memaksimalkan efisiensi transformasi. DH5 Alpha Cell memiliki tiga mutasi berbeda: RecA1, ENDA1, dan LACZΔM15. RecA1 adalah mutasi titik tunggal yang menggantikan glisin 160 dengan dan residu asam aspartat dalam recA polipeptida. Mutasi ini menonaktifkan aktivitas rekombinase dan menonaktifkan rekombinasi homolog. Mutasi ENDA1 menonaktifkan endonuklease intraseluler yang mencegahnya merendahkan plasmid yang dimasukkan.
Gambar 02: DH5 Alpha
Selain itu, mutasi laczΔM15 memungkinkan skrining biru-putih sel yang diubah. Sel -sel ini adalah sel yang kompeten. Mereka sering digunakan dengan transformasi kalsium klorida untuk memasukkan plasmid yang diinginkan. Diidentifikasi oleh penelitian terbaru bahwa sel alpha DH5 dengan metode Hanahan adalah sel kompeten yang paling efisien untuk transformasi plasmid.
BL21 adalah kompeten yang direkayasa secara genetik protease secara genetika E. coli sel terutama digunakan untuk ekspresi protein. Di sisi lain, dh5 alpha adalah kompeten yang direkayasa secara genetik E. coli sel dengan mutasi reca1 terutama digunakan untuk transformasi plasmid. Jadi, ini adalah perbedaan utama antara BL21 dan DH5 Alpha. Selanjutnya, BL21 E. coli Sel tidak memiliki mutasi reca1, sedangkan dh5 alpha E. coli sel memang memiliki mutasi reca1.
Infografis berikut mencantumkan perbedaan antara BL21 dan DH5 Alpha dalam bentuk tabel.
Strain non-patogenik E. coli secara genetik dikembangkan oleh para ilmuwan untuk studi ekspresi laboratorium dan tujuan kloning. BL21 dan DH5 Alpha adalah dua direkayasa secara genetik E. coli sel. BL21 terutama digunakan untuk studi ekspresi protein. Di sisi lain, dh5 alpha terutama digunakan untuk tujuan transformasi plasmid. Dengan demikian, ini adalah ringkasan perbedaan antara BL21 dan DH5 Alpha.
1. “BL21 kompeten e. Coli.”New England Biolabs: Reagents for the Life Sciences Industry.
2. “Dh5-alpha secara kimia kompeten E. Sel coli.”Goldbio.
1. “Analisis manusia-sitomegalovirus-encoded-sumo-targets-dan-temporal-regulation-of-sumoylation-of-pone.0103308.G001 ”oleh Kim E, Kim Y, Kim Y, Lee M, Hayward G, Ahn J-“ Analisis target sumo yang dikodekan sitomegalovirus manusia dan regulasi temporal dari sumoylasi protein langsung IE1 dan IE2 selama infeksi ”plo one. Doi: 10.1371/Jurnal.roti manis.0103308. PMID 25050850. PMC: 4106884 (CC oleh 4.0) Via Commons Wikimedia
2. “Koloni Dh5-Alpha Tumbuh di Lempeng AMP” oleh Balapagos (CC BY-SA 2.0) Via Flickr