Perbedaan antara probe radioaktif dan nonradioaktif
Itu perbedaan utama Antara probe radioaktif dan nonradioaktif adalah itu Probe radioaktif adalah sekuens DNA atau RNA untai tunggal yang diberi label dengan isotop radioaktif sementara probe nonradioaktif adalah urutan DNA atau RNA satu untai tunggal yang diberi label dengan tag kimia atau tag fluorescent.
Hibridisasi asam nukleat adalah teknik penting dalam biologi molekuler, terutama dalam diagnosis mikroba. Ini membantu mengidentifikasi atau mendeteksi urutan asam nukleat tertentu. Dalam teknik ini, asam nukleat difiksasi ke permukaan padat dan hibridisasi dengan probe. Probe adalah fragmen DNA atau RNA yang saling melengkapi dengan urutan minat. Jika urutan target hadir dalam sampel, probe akan hibridisasi dengannya dan membuatnya terdeteksi. Ada dua jenis probe sebagai probe radioaktif dan nonradioaktif. Oleh karena itu, kami dapat menandai probe dengan tag radioaktif atau tag fluorescent.
ISI
1. Ikhtisar dan Perbedaan Utama
2. Apa itu probe radioaktif
3. Apa itu probe nonradioaktif
4. Kesamaan antara probe radioaktif dan nonradioaktif
5. Perbandingan Berdampingan - Probe Radioaktif vs Nonradioaktif Dalam Bentuk Tabel
6. Ringkasan
Apa itu probe radioaktif?
Probe radioaktif adalah fragmen DNA atau RNA untai tunggal dengan tag radioaktif. Radioisotop digunakan dalam menyiapkan probe radioaktif. Radioisotop 32P, 33P dan 35S umumnya digunakan dalam pelabelan probe. Apalagi radioisotop 3Tangan 1251 juga digunakan pada tingkat yang lebih rendah dalam pelabelan probe. Tetapi mereka digunakan untuk aplikasi tertentu. Di antara radioisotop yang berbeda, 32P adalah isotop yang paling umum digunakan dalam memberi label probe radioaktif.
Probe radioaktif memberikan tingkat keandalan dan spesifisitas yang lebih tinggi. Oleh karena itu, mereka memberikan sensitivitas maksimum dan memungkinkan kuantifikasi urutan target yang akurat. Namun, ada beberapa kelemahan yang terkait dengan probe radioaktif. Mereka memiliki waktu paruh pendek. Selain itu, mereka berbahaya dan produksi, penggunaan dan pembuangan bermasalah saat menangani. Selain itu, persiapan probe radioaktif adalah proses yang mahal. Oleh karena itu, karena masalah keamanan dan biaya, probe radioaktif tidak digunakan sebagai probe nonradioaktif saat ini.
Apa itu probe nonradioaktif?
Probe nonradioaktif adalah jenis probe kedua yang diberi label kimia. Digoxigenin adalah probe nonradioaktif, yang merupakan penanda berbasis antibodi. Probe digoxigenin spesifik dan sensitif. Biotin adalah label lain yang digunakan dalam persiapan probe nonradioaktif. Sistem biotin/streptavidin dan digoxigenin/antibodi adalah probe nonradioaktif yang paling umum digunakan dalam hibridisasi. Selanjutnya, sistem peroksidase lobak adalah sistem probe nonradioaktif lainnya. Setelah probe nonradioaktif ini hibridisasi dengan urutan target, mereka dapat dideteksi melalui autoradiografi atau teknik pencitraan lainnya.
Gambar 01: Hibridisasi dengan probe nonradioaktif
Probe nonradioaktif lebih sering digunakan dalam hibridisasi asam nukleat daripada probe radioaktif. Ini karena probe nonradioaktif tidak terkait dengan bahan berbahaya. Selain itu, metode deteksi nonradioaktif membutuhkan waktu paparan yang lebih pendek untuk mendeteksi sinyal hibridisasi. Namun, langkah-langkah yang terlibat dalam hibridisasi DNA dengan probe nonradioaktif biasanya membosankan dan memakan waktu. Selain itu, solusi yang tersedia secara komersial mahal.
Apa kesamaan antara probe radioaktif dan nonradioaktif?
- Probe radioaktif dan nonradioaktif adalah dua jenis probe yang digunakan dalam hibridisasi asam nukleat.
- Mereka memfasilitasi deteksi urutan target dalam sampel.
- Kedua jenis probe sama -sama sensitif dan spesifik.
Apa perbedaan antara probe radioaktif dan nonradioaktif?
Probe radioaktif adalah sekuens DNA atau RNA untai tunggal yang diberi label dengan isotop radioaktif, sedangkan probe nonradioaktif adalah urutan DNA atau RNA untai tunggal yang diberi label dengan tag kimia. Jadi, ini adalah perbedaan utama antara probe radioaktif dan nonradioaktif. Juga, isotop radioaktif berbahaya. Oleh karena itu, probe radioaktif sangat berbahaya, sedangkan probe nonradioaktif tidak berbahaya.
Selain itu, perbedaan lain antara probe radioaktif dan nonradioaktif adalah kelemahannya. Waktu paruh pendek dan bahaya yang terkait dengan produksi, penggunaan, dan pembuangannya adalah kelemahan menggunakan probe radioaktif. Di sisi lain, langkah-langkah yang terlibat dalam hibridisasi DNA dengan probe nonradioaktif biasanya membosankan dan memakan waktu.
Di bawah infografis menunjukkan lebih banyak perbandingan terkait dengan perbedaan antara probe radioaktif dan nonradioaktif.
Ringkasan -Probe Radioaktif vs Nonradioaktif
Probe adalah fragmen DNA atau RNA yang mengandung urutan nukleotida yang saling melengkapi dengan urutan bunga. Untuk mendeteksi urutan target, probe dapat diberi label radioaktif, fluoresensi atau kimia. Probe mengikat dengan urutan komplementer dalam sampel. Probe radioaktif diberi label dengan isotop radioaktif sementara probe nonradioaktif diberi label dengan biotin, digoxigenin atau peroksidase lobak. Dengan demikian, ini adalah perbedaan utama antara probe radioaktif dan nonradioaktif.
Referensi:
1. “Probe Hibridisasi”. En.Wikipedia.Org, 2020, tersedia di sini.
Gambar milik:
1. “Hasil hibridisasi in situ kromosom X dan Y probe BAC” oleh Joanne H. Hsu, Hui Zeng, Kalistyn H. Lemke, Aris a. Polizos, jijik f. Weier, Mei Wang, Anna R. Lawin-O'Brien, Heinz-Ulrich G. Weier dan Benjamin O'Brien - Joanne H. Hsu et al. “Pengulangan DNA spesifik kromosom: Identifikasi cepat dalam silico dan validasi menggunakan hibridisasi fluoresensi in situ” int. J. Mol. Sci. 2013, 14 (1), 57-71; doi: 10.3390/IJMS14010057 (CC oleh 3.0) Via Commons Wikimedia
