Perbedaan antara RP HPLC dan HIC

Itu perbedaan utama antara RP HPLC dan HIC adalah itu RP HPLC menggunakan fase gerak yang lebih polar dan fase stasioner yang kurang polar. Sedangkan, HIC menggunakan fase stasioner hidrofobik yang memungkinkan molekul hidrofobik untuk menempel padanya.

Kromatografi adalah teknik analitik yang membantu memisahkan campuran menjadi komponennya. Pertama, kita harus melarutkan sampel untuk dipisahkan menjadi larutan. Campuran substansi solusi ini disebut fase gerak. Kemudian fase gerak melewati materi lain yang disebut fase stasioner. Fase stasioner menentukan pemisahan komponen. Pemisahan terjadi karena partisi material antara fase gerak dan fase diam.

ISI

1. Ikhtisar dan Perbedaan Utama
2. Apa itu RP HPLC
3. Apa itu hic
4. Perbandingan berdampingan -RP HPLC VS. Hic dalam bentuk tabel
5. Ringkasan

Apa itu RP HPLC?

Istilah RP HPLC berarti Fase terbalik kromatografi cair kinerja tinggi. Ini melibatkan pemisahan komponen dalam campuran, menurut hidrofobisitas. Komponen hidrofobik dalam tautan fase gerak dengan ligan hidrofobik yang diimobilisasi pada fase diam, sementara komponen hidrofilik dielusi melalui fase diam tanpa melekat pada permukaan fase stasioner.

Gambar 01: Peralatan HPLC

Selain itu, metode ini memiliki lebih banyak reproduktifitas dibandingkan dengan teknik kromatografi lainnya, dan juga menunjukkan penerapan yang luas. Oleh karena itu, kami menggunakan metode ini di laboratorium untuk lebih dari 75% dari semua metode HPLC. Sebagian besar waktu, kami menggunakan campuran air dengan pelarut organik kutub yang tidak dapat disembuhkan sebagai fase gerak. Dengan demikian, itu akan memastikan perlekatan komponen hidrofobik dalam larutan ke permukaan fase diam.

Apa itu hic?

Istilah HIC adalah singkatan dari Kromatografi Interaksi Hidrofobik. Ini adalah jenis HPLC fase terbalik, dan metode ini digunakan terutama untuk pemisahan biomolekul besar seperti protein. Dalam metode ini, kita perlu menggunakan media berair untuk membuat sampel biomolekul. Itu karena pelarut organik dapat menyebabkan denaturasi protein. Selain itu, teknik ini menggunakan interaksi antara molekul besar dengan permukaan yang sedikit hidrofobik dari fase diam. Selain itu, kita harus menggunakan konsentrasi garam tinggi dalam sampel karena mendorong protein untuk dipertahankan pada pengemasan; Proses ini disebut Salting Out. Dengan mengurangi konsentrasi garam secara bertahap, kita dapat membuat biomolekul dielusi secara terpisah sesuai dengan hidrofobisitasnya.

Biasanya, metode ini menggunakan kondisi yang berlawanan dengan kromatografi pertukaran ion. Dalam teknik ini, pertama, kita perlu melewati solusi buffer melalui kolom untuk mengurangi solvasi zat terlarut dalam sampel. Itu membuat daerah hidrofobik protein untuk mengekspos. Namun, ketika molekul lebih hidrofobik, lebih sedikit garam yang diperlukan untuk mempromosikan pengikatan. Di sini, zat terlarut yang kurang hidrofobik dielusi terlebih dahulu, dan menurut perubahan konsentrasi garam, lebih banyak zat terlarut hidrofobik dielusi terakhir.

Apa perbedaan antara RP HPLC dan HIC?

Kromatografi adalah teknik analitik untuk pemisahan komponen dalam campuran. RP HPLC dan HIC adalah dua teknik kromatografi khusus. Perbedaan utama antara RP HPLC dan HIC adalah bahwa RP HPLC menggunakan fase gerak yang lebih polar dan fase stasioner yang lebih sedikit, sedangkan HIC menggunakan fase stasioner hidrofobik, yang memungkinkan molekul hidrofobik untuk menempel padanya.

Infografis di bawah ini merangkum perbedaan antara RP HPLC dan HIC.

Ringkasan -RP HPLC VS. Hic

Kromatografi adalah teknik analitik untuk pemisahan komponen dalam campuran. RP HPLC dan HIC adalah dua teknik kromatografi khusus. Perbedaan utama antara RP HPLC dan HIC adalah bahwa RP HPLC menggunakan fase gerak yang lebih polar dan fase stasioner yang kurang polar, sedangkan HIC menggunakan fase stasioner hidrofobik, yang memungkinkan molekul hidrofobik untuk menempel padanya.

Referensi:

1. “Mode Pemisahan HPLC."Waters, tersedia di sini.

Gambar milik:

1. “HPLC Preparatif” oleh Gyassinemrabettalk✉ ini gambar vektor yang tidak ditentukan W3C ini dibuat dengan Inkscape. - Pekerjaan sendiri (CC oleh 3.0) Via Commons Wikimedia