Perbedaan antara afinitas dan kromatografi pertukaran ion

Itu perbedaan utama Antara afinitas dan kromatografi pertukaran ion adalah itu kita dapat menggunakan kromatografi afinitas untuk memisahkan komponen yang bermuatan atau tidak bermuatan dalam campuran sedangkan kita dapat menggunakan kromatografi pertukaran ion untuk memisahkan komponen yang diisi dalam campuran.

Kromatografi adalah teknik yang dapat kita gunakan untuk memisahkan komponen yang diinginkan dalam campuran. Ada berbagai jenis seperti kromatografi cair, kromatografi gas, dll. Kromatografi afinitas dan kromatografi pertukaran ion adalah dua subkategori kromatografi cair. Juga, dalam teknik ini, ada dua fase. Yaitu, mereka adalah fase stasioner dan fase gerak. Tujuan dari teknik -teknik ini adalah untuk memisahkan komponen, tergantung pada pengikatan komponen, pada fase gerak ke permukaan fase stasioner.

ISI

1. Ikhtisar dan Perbedaan Utama
2. Apa itu kromatografi afinitas
3. Apa itu kromatografi pertukaran ion
4. Perbandingan Berdampingan - Afinitas VS Ion Exchange Chromatography Dalam bentuk tabel
5. Ringkasan

Apa itu kromatografi afinitas?

Affinity Chromatography adalah teknik biokimia yang kami gunakan untuk memisahkan komponen dalam campuran tergantung pada interaksi antara komponen -komponen ini.

Interaksi yang kami gunakan dalam kasus ini termasuk berikut:

1. Interaksi antigen-antibodi
2. Interaksi enzim-substrat
3. Interaksi reseptor-ligan
4. Interaksi asam protein-nukleat

Dalam teknik ini, kami menggunakan sifat molekul molekul untuk teknik pemisahan ini. Di sini, kami memungkinkan senyawa yang diinginkan untuk berinteraksi dengan fase diam melalui ikatan hidrogen, interaksi ionik, jembatan disulfida, interaksi hidrofobik, dll. Molekul yang tidak berinteraksi dengan fase stasioner akan dieksploitasi terlebih dahulu. Dengan demikian, kita dapat memisahkannya dari campuran. Senyawa yang diinginkan akan tetap melekat pada fase diam. Oleh karena itu, kita dapat melepaskannya menggunakan pelarut yang dielusi dan membuatnya dieksploitasi untuk memisahkannya juga.

Gambar 01: Kolom kromatografi

Kromatografi afinitas berguna dalam pemurnian dan memusatkan suatu zat dari campuran menggunakan larutan buffer. Juga, sangat membantu dalam mengurangi zat yang tidak diinginkan dalam campuran. Saat mempertimbangkan peralatan yang kami gunakan untuk proses ini, kami harus menggunakan kolom yang diisi dengan fase stasioner kami. Kemudian, kita harus memuat fase gerak yang berisi biomolekul yang akan kita pisahkan. Selanjutnya, izinkan mereka untuk mengikat dengan fase stasioner. Setelah itu, menggunakan buffer cuci, kita dapat memisahkan biomolekul non-target, tetapi molekul target harus memiliki afinitas tinggi untuk fase stasioner untuk berhasil proses pemisahan.

Apa itu kromatografi pertukaran ion?

Kromatografi ion adalah bentuk kromatografi cair di mana kita dapat menganalisis zat ionik. Seringkali, kami menggunakannya untuk menganalisis anion dan kation anorganik (i.e. anion klorida dan nitrat dan kalium, kation natrium). Meskipun kurang umum, kita juga dapat menganalisis ion organik. Selain itu, kita dapat menggunakan teknik ini untuk pemurnian protein karena protein bermuatan molekul pada nilai pH tertentu. Di sini, kami menggunakan fase stasioner padat yang dapat dipasang oleh partikel bermuatan. Misalnya, kita dapat menggunakan kopolimer resin polystyrene-divinylbenzene sebagai dukungan padat.

Gambar 02: Fase kromatografi pertukaran ion

Untuk menjelaskan ini lebih lanjut, fase stasioner memiliki ion tetap seperti anion sulfat atau kation amina kuaterner. Masing -masing harus dikaitkan dengan counteron (ion dengan muatan yang berlawanan), jika kita ingin mempertahankan netralitas sistem ini. Di sini, jika balasannya adalah kation, maka kami menyebutkan sistem sebagai resin pertukaran kation. Tapi, jika counter adalah anion, sistem adalah resin pertukaran anion.

Ada lima fase utama dalam proses pertukaran ion;

1. Tahap awal
2. Adsorpsi target
3. Mulai dari elusi
4. Akhir elusi
5. Regenerasi

Apa perbedaan antara kromatografi afinitas dan pertukaran ion?

Affinity Chromatography adalah teknik biokimia yang kami gunakan untuk memisahkan komponen dalam campuran tergantung pada interaksi antara komponen -komponen ini sedangkan kromatografi ion adalah bentuk kromatografi cair di mana kita dapat menganalisis zat ionik. Oleh karena itu, perbedaan utama antara afinitas dan kromatografi pertukaran ion adalah bahwa kita dapat menggunakan kromatografi pertukaran ion hanya untuk pemisahan zat ionik sedangkan kromatografi afinitas mampu memisahkan kedua partikel yang bermuatan dan tidak bermuatan. Saat mempertimbangkan prinsip kerja, perbedaan antara kromatografi afinitas dan pertukaran ion adalah bahwa kromatografi afinitas berlangsung karena fakta bahwa molekul target memiliki afinitas tinggi untuk fase stasioner. Namun, untuk kromatografi pertukaran ion, molekul target memiliki muatan yang berlawanan dengan permukaan fase stasioner.

Infografis di bawah ini menyajikan perbedaan antara afinitas dan kromatografi pertukaran ion sebagai perbandingan berdampingan.

Ringkasan -kromatografi pertukaran afinitas vs ion

Singkatnya, kromatografi pertukaran afinitas dan ion adalah dua bentuk teknik kromatografi cair. Perbedaan utama antara kromatografi afinitas dan pertukaran ion adalah bahwa kita dapat menggunakan kromatografi afinitas untuk memisahkan komponen yang bermuatan atau tidak bermuatan dalam campuran sedangkan kita dapat menggunakan kromatografi pertukaran ion untuk memisahkan komponen yang diisi dalam campuran.

Referensi:

1. “Kromatografi afinitas.”Wikipedia, Wikimedia Foundation, 5 Okt. 2018. Tersedia disini 
2. Libretexts. “Kromatografi pertukaran ion.”Kimia Libretexts, Libretexts, 29 Dec. 2016. Tersedia disini  

Gambar milik:

1."Nickel Resin" oleh PDCook - karya sendiri, (CC BY -SA 3.0) Via Commons Wikimedia 
2."IEX" oleh Daliak (domain publik) melalui Commons Wikimedia