Perbedaan antara elektroforesis kapiler dan elektroforesis gel

Perbedaan utama - elektroforesis kapiler vs elektroforesis gel
 

Elektroforesis adalah teknik yang digunakan untuk memisahkan biomolekul berdasarkan muatan partikel, ukuran partikel, dan bentuk partikel. Migrasi molekul, yang dikenal sebagai Mobilitas elektroforesis, Tergantung pada jenis polimer/gel yang digunakan, ukuran pori, tegangan yang disediakan, waktu berjalan dan rasio permukaan ke volume. Ada berbagai jenis teknik elektroforesis berdasarkan jenis biomolekul yang digunakan. Jenis elektroforesis pertama yang ditemukan adalah elektroforesis kertas di mana kertas nitroselulosa digunakan sebagai media untuk pemisahan biomolekul. Prinsip elektroforesis gel di mana gel berukuran pori yang berbeda digunakan untuk memisahkan biomolekul, ditemukan kemudian. Teknik elektroforesis gel selanjutnya dimodifikasi untuk meningkatkan keakuratan teknik, dan salah satu modifikasi tersebut adalah elektroforesis kapiler. Perbedaan utama antara elektroforesis kapiler dan elektroforesis gel adalah bahwa Elektroforesis gel dilakukan dalam bidang vertikal atau horizontal menggunakan gel polimer dengan ukuran pori standar sedangkan elektroforesis kapiler dilakukan dalam tabung kapiler dengan cairan polimer atau gel.

ISI

1. Ikhtisar dan Perbedaan Utama
2. Apa itu elektroforesis gel
3. Apa itu elektroforesis kapiler
4. Kesamaan antara elektroforesis kapiler dan elektroforesis gel
5. Perbandingan berdampingan - elektroforesis kapiler vs elektroforesis gel dalam bentuk tabel
6. Ringkasan

Apa itu elektroforesis gel?

Elektroforesis gel adalah teknik yang digunakan untuk memisahkan terutama asam nukleat, protein atau asam amino berdasarkan muatan, ukuran, dan bentuknya. Teknik ini menggunakan gel fisik, yang merupakan zat polimer, sebagai media pemisahan. Gel yang paling umum digunakan adalah agarosa (untuk pemisahan asam nukleat) dan poliakrilamida (untuk pemisahan protein). Peralatan elektroforetik gel berisi baki casting gel untuk menyiapkan gel, casting sisir untuk menyiapkan sumur, tangki buffer, elektroda - positif (anoda) dan negatif (katoda) dan unit pasokan tegangan tegangan. Molekul seperti DNA atau RNA, yang bermuatan negatif, bergerak dari katoda ke anoda dan molekul yang bermuatan positif. Persiapan gel dilakukan sesuai dengan persyaratan. Jika resolusi tinggi atau pemisahan molekul diperlukan, gel konsentrasi tinggi dengan ukuran pori yang lebih rendah harus disiapkan. Molekul yang dipisahkan pada matriks gel diamati setelah teknik pewarnaan. Molekul yang terpisah muncul sebagai pita pada matriks gel.

Gambar 01: Elektroforesis Gel

Elektroforesis gel digunakan dalam diagnostik molekuler seperti sidik jari DNA untuk menentukan adanya fragmen DNA/RNA tertentu atau protein. Elektroforesis gel juga menentukan kemurnian sampel biomolekul yang diekstraksi. Elektroforesis gel dilakukan sebagai langkah awal untuk dan hibridisasi dan sebagai analisis konfirmasi setelah urutan.

Apa itu elektroforesis kapiler?

Elektroforesis kapiler adalah modifikasi elektroforesis gel yang menggunakan prinsip pemisahan yang sama berdasarkan muatan, ukuran molekul, tetapi dilakukan dalam tabung kapiler dengan zat gel atau polimer cair cair. Kapiler disiapkan dari silika yang menyatu, dan setiap tabung kapiler memiliki diameter internal 50-100μm dan panjangnya 25-100cm. Sampel disuntikkan ke dalam tabung kapiler yang mengandung bahan polimer dan dipisahkan jauh lebih cepat daripada elektroforesis gel konvensional. Sistem kapiler terlindungi dengan baik di dalam jaket isolator yang melindungi sampel dari kontaminasi apa pun. Kapiler dapat diisi dengan polimer cair seperti hidroksietil selulosa dan gel resolusi tinggi seperti poliakrilamida. Elektroforesis kapiler memberikan resolusi yang lebih besar; Karenanya pemisahan lebih akurat. Elektroforesis kapiler menggunakan sistem detektor otomatis melalui analisis spektrofotometri. Ini karena rasio luas permukaan terhadap volume yang lebih tinggi.

Gambar 02: Elektroforesis Kapiler

Elektroforesis kapiler digunakan dalam situasi seperti dalam forensik di mana akurasi yang lebih tinggi diperlukan dan tidak umum digunakan karena teknik yang mahal.

Apa kesamaan antara elektroforesis kapiler dan elektroforesis gel?

• Pemisahan molekul di kedua teknik didasarkan pada muatan dan ukuran molekul.
• Kedua teknik dapat digunakan untuk memisahkan asam nukleat dan protein.
• Volume sampel dari kedua teknik adalah sama.
• Kedua teknik menggunakan buffer untuk memfasilitasi pemisahan.

Apa perbedaan antara elektroforesis kapiler dan elektroforesis gel?

Ringkasan - elektroforesis kapiler vs elektroforesis gel

Diagnostik molekuler memainkan peran utama di dunia ilmiah. Identifikasi dan pemurnian DNA, RNA, dan protein adalah langkah penting dalam prosedur diagnostik. Elektroforesis adalah teknik yang memisahkan dan mengidentifikasi biomolekul di kedua elektroforesis gel dan elektroforesis gel kapiler yang jauh lebih lanjut. Elektroforesis gel dilakukan dalam bidang vertikal atau horizontal menggunakan gel polimer dengan ukuran pori standar sedangkan elektroforesis kapiler dilakukan dalam tabung kapiler dengan cairan polimer atau gel. Ini adalah perbedaan antara elektroforesis kapiler dan elektroforesis gel. Setelah menyelesaikan teknik elektroforesis, biomolekul selanjutnya diproses untuk mendapatkan informasi tingkat yang lebih tinggi melalui hibridisasi atau melalui teknik seperti sidik jari.

Unduh versi PDF dari elektroforesis elektroforesis kapiler vs gel elektroforesis

Anda dapat mengunduh versi PDF artikel ini dan menggunakannya untuk tujuan offline sesuai catatan kutipan. Silakan unduh versi PDF di sini perbedaan antara elektroforesis gel dan elektroforesis kapiler.

Referensi:

1. Durney, Brandon C., et al. “Elektroforesis kapiler diterapkan pada DNA: menentukan dan memanfaatkan urutan dan struktur untuk memajukan bioanalyses (2009-2014).”Kimia Analitik dan Bioanalitik, Springer Berlin Heidelberg, 2015, tersedia di sini. Diakses 28 Agustus. 2017.
2. “Elektroforesis.”University of Leicester, 8 Jan. 2009, tersedia di sini. Diakses 28 Agustus. 2017.
3. “Elektroforesis gel.Khan Academy, tersedia di sini. Diakses 28 Agustus. 2017.

Gambar milik:

1. “DNA Agarose Gel Electrophoresis” oleh Sekolah Sumber Daya Alam dari Ann Arbor - DNA Lab (CC oleh 2.0) Via Commons Wikimedia
2. “Skema Instrumen Elektroforesis Gel Kapiler” oleh Chem4066SP13 - Pekerjaan Sendiri (CC BY -SA 3.0) Via Commons Wikimedia