Perbedaan antara fokus kromat dan pemfokusan isoelektrik

Itu perbedaan utama Antara fokus kromat dan fokus isoelektrik adalah itu Fokus kromat adalah jenis metode kromatografi kolom yang memanfaatkan resin pertukaran ion sementara pemfokusan isoelektrik adalah jenis teknik elektroforesis yang memanfaatkan gel gradien pH imobilisasi yang diimobilisasi.

Fokus kromatoffokus dan isoelektrik adalah dua teknik yang memisahkan protein sesuai dengan titik isoelektriknya. Baik fokus kromat dan fokus isoelektrik memiliki daya penyelesaian yang hebat. Fokus kromat adalah metode kromatografi kolom resolusi tinggi sementara pemfokusan isoelektrik adalah metode pemisahan elektroforetik. Selain itu, fokus kromat tidak menggunakan medan listrik sementara pemfokusan isoelektrik membutuhkan medan listrik.

ISI

1. Ikhtisar dan Perbedaan Utama
2. Apa yang dimiliki kromat 
3. Apa itu fokus isoelektrik
4. Kesamaan antara fokus kromat dan pemfokusan isoelektrik
5. Perbandingan berdampingan - fokus kromatoffokus vs isoelektrik dalam bentuk tabel
6. Ringkasan

Apa yang dimiliki kromat?

Fokus kromat adalah jenis kromatografi elusi tinggi yang memisahkan protein sesuai dengan perbedaan titik isoelektriknya. Menggunakan kolom resin pertukaran ion dan gradien pH yang dikembangkan secara internal. Tidak seperti fokus isoelektrik, fokus kromat tidak melibatkan medan listrik. Fokus kromat adalah teknik pemurnian yang kuat yang dapat menyelesaikan molekul yang sangat mirip bahkan hanya berbeda dengan 0.02 Unit PH. Oleh karena itu, fokus kromat paling cocok sebagai langkah pemolesan akhir ketika resolusi tinggi diperlukan dalam memisahkan komponen yang sangat mirip.

Dalam fokus kromat, sampel diterapkan pada kolom dengan mencampurnya dengan buffer start. Protein yang berada pada pH di atas titik isoelektriknya bermuatan negatif dan mereka tetap di dekat bagian atas kolom sementara protein lain yang berada pada pH di bawah titik isoelektriknya, bermigrasi ke bawah kolom. Protein dengan titik isoelektrik tertinggi dielusi terlebih dahulu sementara protein dengan titik isoelektrik terendah dielusi terakhir dari kolom. Teknik ini dipengaruhi oleh beberapa faktor seperti presipitasi protein dan linearitas gradien pH.

Apa itu fokus isoelektrik?

Fokus isoelektrik adalah teknik yang memisahkan molekul yang berbeda berdasarkan titik isoelektriknya. Ini juga dikenal sebagai fokus elektrik. Teknik ini sering digunakan untuk pemisahan protein dalam gel. Dalam fokus isoelektrik, sampel ditambahkan ke dalam gel gradien pH immobilized (IPG). Gel IPG adalah matriks gel akrilamida kopolimerisasi dengan gradien pH. Protein bermigrasi ke arah katoda sampai mereka menemukan daerah pH dari titik isoelektrik mereka. Saat protein mencapai pH yang tidak memiliki muatan bersih, migrasi berhenti dan memberikan pita stasioner. Demikian juga, setiap protein memberikan pita pada titik dalam gradien pH yang sesuai dengan titik isoelektriknya.

Gambar 01: Fokus Isoelektrik

Fokus isoelektrik adalah langkah pertama dari elektroforesis gel dua dimensi. Dalam teknik itu, protein pertama kali dipisahkan sesuai dengan titik isoelektriknya dengan fokus isoelektrik dan kemudian dipisahkan oleh berat molekulnya melalui SDS-PAGE.

Apa kesamaan antara fokus kromat dan fokus isoelektrik?

• Fokus kromatoffokus dan fokus isoelektrik adalah dua metode yang sangat diselesaikan.
• Keduanya didasarkan pada titik protein isoelektrik.
• Teknik -teknik ini menggunakan gradien pH.
• Kedua prosedur ini informatif untuk karakterisasi varian hemoglobin manusia.
• Mereka dapat menyelesaikan molekul di mana nilai PI berbeda hanya dengan 0.02 Unit PH.

Apa perbedaan antara fokus kromat dan pemfokusan isoelektrik?

Fokus kromat adalah teknik kromatografi kolom resolusi tinggi yang memisahkan protein sesuai dengan titik isoelektriknya. Sebaliknya, pemfokusan isoelektrik adalah teknik elektroforetik yang memisahkan protein sesuai dengan titik isoelektriknya dengan penerapan medan listrik di sepanjang gradien pH yang terbentuk dalam kapiler. Jadi, ini adalah perbedaan utama antara fokus kromat dan pemfokusan isoelektrik.

Perbedaan lain antara fokus kromat dan fokus isoelektrik adalah bahwa fokus kromat tidak melibatkan medan listrik sementara pemfokusan isoelektrik membutuhkan medan listrik.

Ringkasan -Fokus ChromatofoFusing vs Isoelektrik

Fokus kromatoffokus dan isoelektrik adalah dua teknik serupa yang memiliki kemampuan molekul penyelesaian tinggi, terutama molekul yang sangat mirip. Fokus kromat adalah teknik kromatografi kolom resolusi tinggi sedangkan fokus isoelektrik adalah metode elektroforesis. Fokus kromat tidak melibatkan medan listrik, tidak seperti fokus isoelektrik. Dengan demikian, ini merangkum perbedaan antara fokus kromat dan pemfokusan isoelektrik.

Referensi:

1. “Fokus Kromat: Prinsip dan Metode.”Sigma, tersedia di sini.
2. “Fokus Isoelektrik”. En.Wikipedia.Org, 2020, tersedia di sini.

Gambar milik:

1. “ISoelectric Focusing Contribute2” oleh MrBean427 - Karya Sendiri (CC BY -SA 3.0) Via Commons Wikimedia