Elektroforesis vs elektroosmosis
Metode pemisahan fisik seperti penyaringan, distilasi, kromatografi kolom bukanlah metode yang mudah ketika datang ke pemisahan beberapa molekul. Elektroforesis dan elektro-osmosis adalah dua teknik pemisahan lainnya yang dapat digunakan untuk memisahkan partikel bermuatan.
Apa itu elektroforesis?
Elektroforesis adalah teknik memisahkan molekul berdasarkan ukurannya. Fundamental untuk pemisahan ini adalah muatan molekul dan kemampuan mereka untuk bergerak dalam medan listrik. Ini adalah teknik paling umum dan utama dalam biologi molekuler untuk memisahkan molekul, terutama DNA dan protein. Ini sebagian besar digunakan karena relatif mudah dan murah. Peralatan untuk elektroforesis bisa sedikit rumit, dan persiapannya membutuhkan waktu. Tetapi kita dapat dengan mudah membuat peralatan elektroforesis dari hal -hal yang kita miliki di laboratorium. Teknik elektroforesis dapat bervariasi tergantung pada tujuan kami. Kita dapat menggunakan elektroforesis satu dimensi untuk pemisahan DNA atau protein. Elektroforesis dua dimensi digunakan ketika sampel yang lebih terselesaikan diperlukan (seperti dalam kasus pencetakan jari). Gel digunakan sebagai media pendukung untuk memisahkan molekul. Gel ini dapat disiapkan sebagai lembaran datar atau dalam tabung. Dasar dari prosedur ini adalah memisahkan molekul tergantung pada laju pergerakannya melalui gel saat medan listrik disediakan. Molekul bermuatan negatif seperti DNA cenderung melakukan perjalanan ke arah kutub positif di medan listrik ini sementara molekul bermuatan positif cenderung melakukan perjalanan ke kutub negatif. Dua jenis gel digunakan dalam elektroforesis sebagai agarosa dan poliakrilamida. Keduanya memiliki kekuatan penyelesaian yang berbeda. Gel bertindak sebagai ayakan untuk menyaring berbagai ukuran molekul. Muatan elektrostatik yang diatur dalam tindakan gel sebagai gaya.
Pemisahan tergantung pada mobilitas ion.
F = fv = zee
V = zee/ f
F = gaya yang bekerja pada suatu partikel
f = koefisien gesekan
V = kecepatan migrasi rata -rata
Z = muatan partikel yang bermigrasi
E = Biaya Dasar
E = Kekuatan medan listrik
Kondisi yang diperlukan untuk elektroforesis relatif sederhana. Saat membuat gel dan menjalankan sampel, buffer digunakan. Penanda dan pewarna digunakan untuk tujuan visualisasi.
Apa itu elektro-osmosis?
Ini adalah proses memindahkan cairan melalui bahan menggunakan medan listrik yang diterapkan. Gerakan ini bisa melalui bahan berpori, di sepanjang kapiler, membran dll. Ini dapat digunakan sebagai teknik pemisahan (terutama elektro-osmosis kapiler). Kecepatan cairan sebanding secara linear dengan medan listrik yang diterapkan. Itu juga tergantung pada bahan yang digunakan untuk membangun saluran dan solusi yang digunakan. Dalam antarmuka, solusi dan material telah memperoleh muatan yang berlawanan dan, ini dikenal sebagai lapisan ganda listrik. Saat medan listrik diterapkan pada larutan, lapisan ganda listrik bergerak dengan gaya Coulomb yang dihasilkan. Ini dikenal sebagai aliran elektro-osmotik.
Apa perbedaan antara elektroforesis dan elektro-osmosis? • Dalam elektroforesis, partikel padat (makromolekul seperti asam atau protein nukleat) dipindahkan menggunakan medan listrik. Tetapi dalam elektro-osmosis cairan bergerak. • Dalam elektroforesis, bahan padat dukungan adalah gel. Tapi itu elektro-osmosis itu bisa berupa gel, membran, kapiler, dll. |