Perbedaan antara GFP dan EGFP

Itu perbedaan utama antara GFP dan EGFP adalah bahwa GFP IS Protein tipe liar yang dimasukkan dalam kloning molekuler sel non-mamalia sedangkan EGFP adalah jenis GFP yang ditingkatkan atau direkayasa yang dapat digunakan pada sel mamalia.

Kloning molekuler adalah teknik canggih yang sangat digunakan oleh para ilmuwan dalam mengekspresikan protein melalui teknologi rekombinan. Dalam teknologi DNA rekombinan, perlu mengubah vektor rekombinan berhasil menjadi tuan rumah organisme.  Oleh karena itu, selama proses transformasi, harus diidentifikasi dan dikonfirmasi apakah gen yang menarik telah diubah atau tidak menjadi host. Untuk menilai ini, ahli biologi molekuler mengadopsi beberapa teknik. Dari teknik -teknik itu, satu adalah gen reporter. Gen reporter ini bertindak sebagai penanda yang dapat dipilih untuk memilih transforman yang benar. Dengan demikian, protein fluoresen hijau (GFP) dan peningkatan protein fluoresen hijau (EGFP) adalah dua protein reporter yang digunakan dalam kloning molekuler.

ISI

1. Ikhtisar dan Perbedaan Utama
2. Apa itu GFP
3. Apa itu EGFP
4. Kesamaan antara GFP dan EGFP
5. Perbandingan berdampingan - GFP vs EGFP dalam bentuk tabel
6. Ringkasan

Apa itu GFP?

GFP adalah protein tipe liar yang mengandung 238 residu asam amino dan beberapa daerah yang dapat dipilih dari sekuens asam amino yang membedakannya dari protein fluorescent lainnya. Selain itu, protein tipe liar ini awalnya dalam isolasi Aequorea Victoria; Jenis ubur -ubur. Namun, dalam fenomena alam, ubur -ubur mampu menghasilkan fluoresensi warna hijau sebagai respons terhadap rangsangan tertentu.

Sebelumnya, konsep ini mengejutkan para ilmuwan, dan mereka memutuskan untuk menggunakannya pada teknologi DNA rekombinan mereka. Akibatnya, para ilmuwan menggunakan bentuk mutan gen tipe liar ini sebagai gen reporter dalam studi ekspresi gen mereka. Gen tipe liar GFP mampu menghasilkan protein yang memberikan fluoresensi pada suhu kamar atau di bawah cahaya UV. Oleh karena itu, ketika dimasukkan ke dalam transforman, ia mengekspresikan dan menghasilkan fluoresensi. Jika fluoresensi dihasilkan setelah proses transformasi, ia mengkonfirmasi keberhasilan proses transformasi. Dengan kata -kata sederhana, emisi fluoresensi menandakan keberhasilan transformasi vektor yang membawa gen yang menarik ke dalam host.

Gambar 01: GFP

Karena alasan ini, GFP bertindak sebagai in vivo penanda ekspresi gen. Saat ini, teknik rekayasa genetika digunakan untuk menghasilkan GFP. Juga, banyak versi GFP yang ditingkatkan seperti EGFP tersedia. Oleh karena itu, ini memungkinkan penggunaan GFP yang efisien dalam kloning molekuler dan studi ekspresi gen.

Apa itu EGFP?

Protein fluorescent hijau yang ditingkatkan atau EGFP adalah versi GFP yang lebih baik. Dengan kata-kata sederhana, kita dapat mendefinisikan EGFP sebagai versi rekayasa GFP tipe liar. Saat gen tipe liar GFP bermutasi, itu menghasilkan efek menguntungkan. Oleh karena itu, gen GFP yang bermutasi memungkinkan ekspresi karakter baru, dan sebagai akibatnya, kita dapat menghasilkan GFP yang ditingkatkan dengan karakteristik yang lebih baik. Selain itu, kita dapat memperkenalkan mutasi dengan sukses ke gen GFP tipe liar menggunakan iradiasi atau metode kimia. Gen -gen bermutasi ini kemudian menghasilkan EGFP, yang memiliki karakteristik yang lebih menguntungkan.

Gambar 02: EGFP

Karakteristik EGFP yang ditingkatkan adalah sebagai berikut;

• Mampu memancarkan sinyal fluoresensi yang lebih kuat.
• Memiliki sensitivitas tinggi.
• Dapat menggunakannya pada sel mamalia alih -alih prokariota dan eukariota tingkat bawah lainnya.
• Juga, memberikan peningkatan kemurnian produk.

Oleh karena itu, dibandingkan dengan GFP, EGFP adalah pilihan yang disukai untuk studi ekspresi gen. Namun, produk lebih mahal dibandingkan dengan GFP.

Apa kesamaan antara GFP dan EGFP?

• GFP dan EGFP adalah dua protein yang memiliki kemampuan untuk memancarkan warna hijau
• Oleh karena itu, keduanya berfungsi sebagai protein reporter dalam studi ekspresi gen.
• Juga, dimungkinkan untuk mensintesis keduanya menggunakan teknologi DNA rekombinan.
• Selain itu, mudah untuk lebih jauh bermutasi kedua jenis ini untuk mensintesis bentuk yang ditingkatkan.

Apa perbedaan antara GFP dan EGFP?

Gen reporter adalah gen yang melekat pada gen minat dalam teknologi DNA rekombinan. Ini menandakan keberhasilan transformasi vektor rekombinan menjadi tuan rumah. Di sini, GFP dan EGFP adalah dua jenis protein florescent hijau yang berfungsi sebagai protein reporter. Namun, perbedaan utama antara GFP dan EGFP adalah bahwa GFP adalah tipe liar sedangkan EGFP adalah versi rekayasa GFP. Selanjutnya, EGFP memiliki karakteristik yang lebih menguntungkan daripada GFP. Misalnya, EGFP menghasilkan cahaya fluoresen yang lebih kuat dan lebih sensitif daripada GFP. Perbedaan lain antara GFP dan EGFP adalah sistem di mana kita dapat menggunakannya. Sistem non-mamalia menggunakan GFP saat sistem mamalia menggunakan EGFP.

Infografis di bawah ini menyajikan perbedaan antara GFP dan EGFP dalam bentuk tabel.

Ringkasan -GFP vs EGFP

GFP dan EGFP adalah protein reporter dalam kloning molekuler dan studi ekspresi gen. GFP adalah protein tipe liar, yang merupakan protein fluoresen hijau. Protein awalnya dalam isolasi dari ubur -ubur Aequorea Victoria. Sebaliknya, EFGP adalah bentuk yang ditingkatkan dari protein GFP. Ini adalah mutan tipe liar dengan karakteristik yang lebih baik. Oleh karena itu, EFGP memiliki kekuatan sinyal yang lebih tinggi dan sensitivitas yang lebih tinggi. Oleh karena itu, kita dapat menggunakannya pada vektor mamalia. Sebaliknya, penggunaan GFP terutama hanya pada vektor non -mamalia. Di Over All, ini adalah perbedaan antara GFP dan EGFP.

Referensi:

1.Cinelli, R A, dkk. “Protein fluoresen hijau yang ditingkatkan sebagai alat untuk analisis dinamika protein dan lokalisasi: studi fluoresensi lokal pada tingkat molekul tunggal.Fotokimia dan fotobiologi., U.S. Perpustakaan Kedokteran Nasional, Juni 2000. Tersedia disini  
2.“PDB101: Molekul Bulan Ini: Green Fluorescent Protein (GFP).”RCSB: PDB-101. Tersedia disini

Gambar milik:

1."Film Protein Fluorescent GFP" oleh Erin Rod - karya sendiri, (CC BY -SA 4.0) Via Commons Wikimedia 
2.”Ca2 Amigo2 EGFP Mouse” oleh Dudek, Serena; Curuana, Douglas; Carstens, Kelly - pekerjaan sendiri, (CC BY -SA 3.0) Via Commons Wikimedia