Perbedaan antara imunofluoresensi dan imunohistokimia

Perbedaan utama - imunofluoresensi vs imunohistokimia
 

Diagnostik penyakit, yang menggunakan metode biologis molekuler, telah menjadi area yang muncul dari teknologi laboratorium klinis. Ini mencakup semua tes dan metode untuk mengidentifikasi suatu penyakit dan memahami penyebab penyakit dengan menganalisis DNA, RNA atau protein yang diekspresikan dalam suatu organisme. Kemajuan cepat dalam diagnostik molekuler telah memungkinkan penelitian dasar tentang penyakit menular dan tidak menular. Ini digunakan untuk menentukan perubahan tingkat urutan atau ekspresi pada gen penting atau protein yang terlibat dalam penyakit. Imunofluoresensi (IF) dan imunohistokimia (IHC) adalah dua teknik yang banyak digunakan dalam biologi kanker. Jika adalah jenis IHC di mana metode deteksi fluoresensi digunakan untuk menganalisis antibodi monoklonal dan poliklonal, sedangkan IHC menggunakan metode berbasis kimia untuk mendeteksi antibodi monoklonal dan poliklonal. Ini adalah perbedaan utama antara IF dan IHC.

ISI

1. Ikhtisar dan Perbedaan Utama
2. Apa itu imunofluoresensi 
3. Apa itu imunohistokimia
4. Kesamaan antara imunofluoresensi dan imunohistokimia
5. Perbandingan berdampingan - imunofluoresensi vs imunohistokimia dalam bentuk tabel
6. Ringkasan

Apa itu imunofluoresensi (jika)?

Imunofluoresensi adalah teknik deteksi di mana antibodi yang digunakan dalam pengujian diberi label menggunakan pewarna fluorescent atau protein fluorescent untuk tujuan deteksi. Antibodi sekunder berlabel dapat menghasilkan sinyal latar belakang yang tidak diinginkan; Oleh karena itu, jika teknik didasarkan pada pelabelan antibodi primer itu sendiri untuk menghindari sinyal yang tidak diinginkan selama deteksi. Melalui teknik ini, ikatan non-spesifik antara antibodi primer dan sekunder dicegah, dan lebih cepat karena tidak ada langkah inkubasi sekunder yang terlibat. Kualitas data juga ditingkatkan.

Gambar 01: pewarnaan imunofluoresensi ganda untuk Brdu, Neun, dan GFAP

Fluorokrom atau pewarna fluoresen adalah senyawa yang dapat menyerap radiasi, lebih disukai radiasi ultra violet yang tereksitasi. Ketika partikel mencapai keadaan dasar dari keadaan tereksitasi, mereka memancarkan radiasi yang ditangkap dan dideteksi oleh detektor untuk membentuk spektrum. Sangat penting bahwa label fluorescent kompatibel dan stabil untuk reaksi tertentu dan harus dikonjugasikan dengan benar dengan antibodi untuk mendapatkan hasil yang akurat. Salah satu fluorokrom yang paling banyak digunakan adalah fluorescein isothiocyanate (FITC), yang berwarna hijau, dengan panjang gelombang puncak penyerapan dan emisi masing -masing 490 nm dan 520 nm. Rhodamine, zat lain yang digunakan dalam IF, berwarna merah dan memiliki panjang gelombang puncak penyerapan dan emisi dari 553 nm dan 627 nm.

Apa itu imunohistokimia (IHC)?

IHC adalah metode pengujian molekuler yang dipraktikkan untuk mengidentifikasi dan mengkonfirmasi keberadaan antigen di sel target. Sel target bisa menjadi partikel infeksius, patogen mikroba atau sel tumor ganas. IHC menggunakan antibodi monoklonal dan poliklonal untuk menentukan keberadaan antigen yang ada pada permukaan sel sel target. Teknik ini didasarkan pada pengikatan antigen-antibodi. Penanda deteksi terkonjugasi dengan antibodi ini untuk mendeteksi ada atau tidak adanya antigen tertentu. Penanda ini dapat berupa penanda kimia seperti enzim, antibodi yang ditandai dengan fluoresensi atau antibodi berlabel radio.

Gambar 02: Irisan otak tikus diwarnai oleh imunohistokimia

Aplikasi IHC yang paling populer adalah dalam biologi sel kanker untuk mengidentifikasi keberadaan tumor ganas, tetapi juga digunakan untuk mendeteksi penyakit menular.

Apa kesamaan antara imunofluoresensi dan imunohistokimia?

• Imunofluoresensi dan imunohistokimia terjadi dalam kondisi in vitro.
• Kedua teknik didasarkan pada antigen-antibodi
• Keduanya adalah teknik yang sangat cepat.
• Hasil teknik dapat direproduksi.
• Keduanya telah meningkatkan kualitas data.
• Teknik -teknik ini digunakan dalam diagnostik untuk kanker dan penyakit menular.

Apa perbedaan antara imunofluoresensi dan imunohistokimia?

Ringkasan -imunofluoresensi vs imunohistokimia

Mekanisme molekuler telah membawa banyak perubahan dalam bidang kedokteran, menimbulkan metode pengujian molekuler canggih yang telah membawa revolusi di bidang diagnostik. Penemuan ini telah menyebabkan identifikasi dan konfirmasi penyakit yang cepat dan akurat, sehingga memungkinkan keberhasilan pemberian dan produksi obat. Teknik -teknik ini juga digunakan dalam farmakologi untuk menemukan target obat dan untuk mengkonfirmasi sifat farmakokinetik obat selama metabolisme obat.  Jika dan IHC adalah dua metode diagnostik yang didasarkan pada konsep pengikatan antigen dan antibodi, meskipun mode deteksi di kedua teknik berbeda. Jika menggunakan prinsip fluoresensi untuk mendeteksi antigen dan IHC menggunakan konsep konjugasi kimia untuk mendeteksi antigen. Inilah perbedaan antara IF dan IHC.

Unduh versi pdf dari imunofluoresensi vs imunohistokimia

Anda dapat mengunduh versi PDF artikel ini dan menggunakannya untuk tujuan offline sesuai catatan kutipan. Silakan unduh versi pdf di sini perbedaan antara imunofluoresensi dan imunohistokimia.

Referensi:

1. Aoki, Valéria, dkk. “Imunofluoresensi langsung dan tidak langsung."Anais Brasileiros de Dermatologia, Sociedadebrasileira de Dermatologia, tersedia di sini. Diakses 25 Agustus. 2017.
2. Duraiyan, Jeyapradha, dkk. “Aplikasi imunohistokimia.”Jurnal Farmasi & Ilmu Bioallied, Medknow Publications & Media Pvt Ltd, AUG. 2012, tersedia di sini. Diakses 25 Agustus. 2017.

Gambar milik:

1. “Pewarnaan Imunofluoresensi Ganda untuk Brdu, Neun dan Gfap” oleh Ma M, Ma Y, Yi X, Guo R, Zhu W, Fan X, Xu G, Frey WH 2, Liu X. - Pengiriman intranasal mengubah faktor pertumbuhan-beta1 pada tikus setelah stroke mengurangi volume infark dan meningkatkan neurogenesis di zona subventrikular; PMID 19077183 (CC oleh 2.0) Via Commons Wikimedia
2. “Hipotalamus jaringan tikus yang diwarnai oleh ABC-Immunohistochemistry” oleh Zabbn-karya sendiri (CC BY-SA 3.0) Via Commons Wikimedia