Perbedaan antara elektroforesis gel horizontal dan vertikal

Perbedaan kunci - elektroforesis gel horizontal vs vertikal
 

Elektroforesis gel adalah teknik laboratorium yang digunakan dalam genetika untuk memisahkan campuran yang mengandung DNA, RNA, dan protein lain sesuai dengan muatan masing -masing dan ukuran molekulnya. DNA, RNA atau protein yang perlu dipisahkan dalam metode ini dijalankan melalui gel yang mengandung pori -pori kecil. Molekul didorong melalui gel oleh medan listrik. Molekul melewati pori -pori gel, dan kecepatan gerakan berbanding terbalik dengan panjangnya masing -masing. Oleh karena itu, molekul dengan ukuran molekul yang lebih rendah akan bergerak lebih cepat daripada molekul dengan berat molekul yang lebih tinggi. Medan listrik dihasilkan oleh perbedaan muatan di dua ujung gel. Satu ujung berisi muatan positif, dan ujung lainnya berisi muatan negatif. Karena molekul DNA dan RNA bermuatan negatif, mereka akan tertarik pada ujung gel yang bermuatan positif. Elektroforesis gel dapat dari dua metode yang berbeda: elektroforesis gel horizontal dan elektroforesis gel vertikal. Dalam elektroforesis gel horizontal, gel hadir dalam orientasi horizontal dan terendam dalam buffer berjalan terus menerus yang ada di dalam kotak gel itu sendiri. Dalam elektroforesis gel vertikal, sistem buffer berorientasi vertikal dan terputus dengan dua ruang yang ada di bagian atas dan bagian bawah dengan katoda dan anoda, masing -masing. Ini adalah perbedaan utama antara elektroforesis gel horizontal dan vertikal.

ISI

1. Ikhtisar dan Perbedaan Utama
2. Apa itu elektroforesis gel horizontal
3. Apa itu elektroforesis gel vertikal
4. Kesamaan antara elektroforesis gel horizontal dan vertikal
5. Perbandingan berdampingan - elektroforesis gel horizontal vs vertikal dalam bentuk tabel
6. Ringkasan

Apa itu elektroforesis gel horizontal?

Elektroforesis gel horizontal menggunakan teori dasar untuk pemisahan DNA, RNA atau molekul protein sesuai dengan ukuran dan muatan molekul masing -masing. Dalam teknik ini, gel hadir dalam orientasi horizontal dan terendam dalam buffer yang kontinu. Gel agarosa digunakan untuk memisahkan kotak gel menjadi dua kompartemen. Salah satu ujung kotak gel berisi anoda sementara ujung lainnya berisi katoda. Saat arus diterapkan, buffer yang digunakan dalam teknik ini memungkinkan pembuatan gradien muatan. Saat muatan diterapkan, gel cenderung memanas. Buffer juga berfungsi sebagai pendingin, yang mempertahankan suhu pada level optimal. Resirkulasi buffer berjalan mencegah pembentukan gradien pH. Sistem buffer terputus tidak dapat digunakan dalam elektroforesis gel horizontal karena dua kompartemen sistem gel terhubung dengan buffer berjalan. Acrylamide digunakan selama elektroforesis gel untuk memisahkan campuran protein.

Gambar 01: Elektroforesis gel horizontal

Dalam elektroforesis gel horizontal, akrilamida tidak dapat digunakan karena kotak gel terpapar oksigen. Karena adanya oksigen, polimerisasi akrilamida dihambat, dan ini mengganggu pembentukan gel. Elektroforesis gel horizontal adalah metode yang mudah digunakan yang digunakan dalam pemisahan DNA dan RNA.

Apa itu elektroforesis gel vertikal?

Teknik Elektroforesis Gel Vertikal Fungsi Menurut teori utama elektroforesis gel, tetapi dianggap lebih kompleks daripada metode elektroforesis gel horizontal. Teknik ini menggunakan buffer yang terputus -putus. Katoda terletak di ruang atas, dan anoda terletak di ruang bawah. Elektroda yang ada di setiap kompartemen menyediakan medan listrik yang diperlukan. Lapisan tipis gel dituangkan di antara dua pelat kaca yang dipasang. Oleh karena itu, bagian atas gel terendam di ruang atas, dan bagian bawah gel terendam di dalam ruang di bagian bawah. Setelah arus diterapkan, sebagian kecil buffer bergerak ke ruang bawah dari ruang atas melalui gel. Arus yang diterapkan dalam teknik ini adalah unit menit.

Gambar 02: Elektroforesis Gel Vertikal

Dalam elektroforesis gel vertikal, buffer hanya mengalir melalui gel. Ini memungkinkan kontrol akurat gradien tegangan selama tahap pemisahan. Gel akrilamida dapat digunakan karena kompartemen tidak terpapar oksigen atmosfer. Karena ukuran pori yang lebih kecil dari gel akrilamida, pemisahan yang tepat dapat dicapai dengan resolusi yang lebih tinggi.

Apa kesamaan antara elektroforesis gel horizontal dan vertikal?

• Kedua sistem berfungsi sesuai dengan teori dasar elektroforesis gel.
• Anoda dan katoda digunakan untuk menyediakan medan listrik yang diperlukan di kedua sistem.

Apa perbedaan antara elektroforesis gel horizontal dan vertikal?

Ringkasan -elektroforesis gel horizontal vs vertikal

Elektroforesis gel adalah teknik laboratorium yang banyak digunakan dalam pemisahan campuran yang mengandung molekul DNA, RNA, dan protein. Ada dua metode elektroforesis gel: elektroforesis gel horizontal dan vertikal. Dalam elektroforesis gel horizontal, buffer berjalan terus menerus sementara dalam elektroforesis gel vertikal, itu terputus -putus. Ini adalah perbedaan antara elektroforesis gel horizontal dan vertikal. Kedua sistem berfungsi sesuai dengan prinsip umum elektroforesis gel.

Unduh Versi PDF dari elektroforesis gel horizontal vs vertikal

Anda dapat mengunduh versi PDF artikel ini dan menggunakannya untuk tujuan offline sesuai catatan kutipan. Silakan unduh versi pdf di sini perbedaan antara elektroforesis gel horizontal dan vertikal.

Referensi:

1.Warren, Chad M., et al. “Elektroforesis gel agarosa vertikal dan elektroblot protein dengan berat molekul tinggi.”Elektroforesis, Vol. 24, no. 11, 2003, pp. 1695-1702., doi: 10.1002/ELP.200305392.
2.“Sistem gel horizontal dan vertikal - sistem gel horizontal."Diagnostik nasional, tersedia di sini. Diakses 28 Agustus. 2017.

Gambar milik:

1. "Gel Electrophoresis Apparatus" oleh Jeffrey M. Vinocur - Pekerjaan Sendiri (CC oleh 2.5) Via Commons Wikimedia
2. “Elektroforesis Gel Polyacrylamide Protein” oleh Jean-Etienne Minh-Duy Poirrier dari Bruxelles, Belgia-Protein dalam Elektroforesis Gel 1D (CC BY-SA 2.0) Via Commons Wikimedia