Perbedaan antara PCR dan PCR real-time
Itu Perbedaan utama antara PCR dan PCR real-time adalah bahwa PCR konvensional lebih memakan waktu daripada PCR real-time karena menggunakan elektroforesis gel untuk menganalisis produk PCR yang diamplifikasi.
PCR atau reaksi berantai polimerase adalah penemuan revolusioner dalam biologi molekuler modern, yang pertama kali dikembangkan oleh ahli kimia Kary Mullis pada tahun 1983. Ini memungkinkan urutan tunggal dalam DNA kompleks untuk diamplifikasi untuk analisis.
ISI
1. Ikhtisar dan Perbedaan Utama
2. Apa itu PCR
3. Apa itu real-time pcr
4. PCR vs PCR real-time dalam bentuk tabel
5. Ringkasan - PCR vs PCR real -time
Apa itu PCR?
Gagasan dasar PCR atau reaksi berantai polimerase adalah bahwa dua primer, yang saling melengkapi dengan untaian yang berlawanan dari urutan DNA, berorientasi pada satu sama lain; Primer menghasilkan untaian pelengkap, masing -masing berisi primer lainnya. Oleh karena itu, hasilnya adalah sejumlah besar urutan yang sesuai dengan DNA yang terletak di antara kedua primer. Enzim DNA polimerase digunakan untuk memperpanjang primer dalam PCR. DNA polimerase adalah enzim termostabil, dan memiliki kemampuan untuk bertahan hidup dalam suhu tinggi (94 hingga 95 ° C) yang digunakan untuk denaturasi DNA templat.
PCR melibatkan tiga langkah, yaitu putaran denaturasi yang diulang, anil primer, dan sintesis DNA. Mesin Thermocycler digunakan untuk melakukan reaksi ini sehingga dapat diprogram untuk mengubah suhu dengan cepat dan akurat. Aplikasi PCR termasuk investigasi kriminal, sidik jari DNA, deteksi patogen, dan analisis DNA spesies manusia awal.
Apa itu PCR konvensional?
Ada tiga tahap utama PCR konvensional: Tahap amplifikasi DNA, pemisahan PCR, dan deteksi produk. Pemisahan segmen DNA biasanya dilakukan oleh elektroforesis gel agarosa. Produk kemudian diwarnai dengan etidium bromida. Akhirnya, deteksi dicapai dengan visualisasi pita ke gel di bawah lampu UV. Oleh karena itu, hasil akhir PCR konvensional tidak dinyatakan sebagai angka. Biasanya PCR konvensional hanya dapat mendeteksi satu parameter tunggal.
Apa itu real-time pcr?
PCR real-time dapat mendeteksi amplifikasi produk, karena produk disintesis. Dengan perkembangan teknologi, PCR telah menjadi teknik yang sangat populer, terutama untuk deteksi dan identifikasi bakteri dalam makanan. PCR real-time menggunakan sistem pewarna florescent dan termocycler yang dilengkapi dengan kemampuan deteksi fluorescent.
Apa perbedaan antara PCR dan PCR real-time?
Perbedaan utama antara PCR dan PCR real-time adalah bahwa PCR konvensional lebih memakan waktu karena menggunakan elektroforesis gel untuk menganalisis produk PCR yang diamplifikasi sementara PCR real-time kurang memakan waktu karena dapat mendeteksi amplifikasi selama fase awal dari reaksinya. PCR real-time mengumpulkan data pada fase pertumbuhan eksponensial PCR sementara PCR tradisional mengumpulkan data pada titik akhir reaksi. Selain itu, hasil titik akhir dari PCR konvensional mungkin tidak terlalu tepat, tetapi hasil PCR real-time sangat tepat. Selain itu, PCR real-time lebih sensitif daripada PCR konvensional.
Selain itu, PCR konvensional memiliki resolusi yang sangat buruk sementara PCR real-time dapat mendeteksi sangat sedikit perubahan karena resolusi yang tinggi. Selain itu, deteksi titik akhir PCR konvensional memiliki rentang dinamis pendek sementara deteksi PCR real-time memiliki rentang dinamis yang luas. Juga, tidak seperti PCR konvensional, teknik deteksi otomatis ditemukan dalam PCR real-time. PCR konvensional lebih canggih dan padat karya daripada PCR real-time. Tidak seperti PCR real-time, PCR konvensional tidak dapat membedakan antara bakteri mati dan hidup. Selain itu, PCR real-time menggunakan sistem pewarna fluoresen untuk mendeteksi produk sementara PCR konvensional menggunakan etidium bromida dan cahaya UV untuk memvisualisasikan pita dalam medium gel agarosa.
Infografis di bawah ini menyajikan perbedaan antara PCR dan PCR real-time dalam bentuk tabel untuk perbandingan berdampingan.
Ringkasan -PCR vs PCR real -time
Perbedaan utama antara PCR dan PCR real-time adalah bahwa PCR konvensional lebih memakan waktu daripada PCR real-time karena menggunakan elektroforesis gel untuk menganalisis produk PCR yang diamplifikasi. Selain itu, PCR real-time menggunakan sistem pewarna fluoresen untuk mendeteksi produk sementara PCR konvensional menggunakan etidium bromida dan cahaya UV untuk memvisualisasikan pita dalam medium gel agarosa.
Gambar milik:
1. "Reaksi Rantai Polimerase-en" oleh Enzoklop-karya sendiri (CC BY-SA 4.0) Via Commons Wikimedia
