Perbedaan antara vektor fag YAC dan M13
Perbedaan Utama - YAC vs M13 FAGE Vektor
Kloning DNA adalah proses penting yang memungkinkan penyebaran fragmen DNA penting dari organisme. Ini membutuhkan bergabungnya DNA spesifik dengan DNA vektor untuk membuat DNA rekombinan yang berubah menjadi organisme inang. Vektor adalah molekul DNA yang berperilaku sebagai kendaraan untuk membawa bahan genetik asing ke dalam sel atau organisme lain. Itu harus mampu mereplikasi di dalam organisme inang dan menghasilkan banyak salinan DNA rekombinan. Ada berbagai jenis vektor yang digunakan dalam kloning DNA. Ragi kromosom buatan (YAC) dan vektor fag M13 adalah dua jenis di antaranya. Perbedaan utama antara vektor fag yac dan m13 adalah itu YAC adalah kromosom buatan yang direplikasi dalam sel ragi ketika Vektor fag M13 adalah DNA melingkar tunggal dari bakteriofag M13 yang bereplikasi E coli sel.
ISI
1. Ikhtisar dan Perbedaan Utama
2. Apa itu YAC
3. Apa itu vektor fag m13
4. Perbandingan berdampingan - YAC vs M13 fag vektor
5. Ringkasan
Apa itu vektor yac?
YAC adalah kromosom yang dibangun secara artifisial yang memiliki kemampuan untuk membawa segmen besar DNA asing dan bereplikasi di dalam sel ragi. Ini memiliki urutan sentromer, telomer, dan replikasi yang penting untuk replikasi dan stabilitas. YAC juga harus menanggung penanda atau penanda selektif dan situs pembatasan untuk menjadikannya vektor kloning yang efektif. Urutan besar mulai dari 1000 kb hingga 2000 kb dapat dimasukkan ke dalam YAC dan ditransfer ke ragi.
Gambar 01: Vektor YAC
Apa itu vektor fag m13?
Bakteriofag M13 adalah virus yang menginfeksi dan mereplikasi E coli. Genom bakteriofag M13 berukuran kecil, sekitar 6.7 kb. Ini adalah DNA indera yang beruntai tunggal, melingkar dan positif. Virus ini secara khusus menginfeksi E coli Bakteri melalui pilus F. Setelah memasukkan ssDNA ke dalam bakteri, ia mensintesis untaian komplementernya dan menjadi dsDNA atau bentuk replikasi (RF) dari M13. RF dapat berperilaku seperti plasmid dalam organisme inang. DSDNA mereplikasi di dalam E coli dan menghasilkan ssDNA yang membawa fag baru. Fag baru ini terus dilepaskan dari E coli tanpa membunuh sel inang. Namun, infeksi memperlambat pertumbuhan e coli. dsDNA dapat diekstraksi dari sel bakteri dan digunakan sebagai vektor dalam kloning DNA. Mereka dikenal sebagai vektor fag M13. Mereka dapat dengan mudah dimanipulasi dan digunakan serupa dengan vektor plasmid.
Kemampuan inheren infeksi fag M13 ini berfungsi sebagai kualifikasi yang baik untuk digunakan sebagai vektor dalam kloning gen. Saat mengembangkan M13 menjadi vektor, beberapa elemen harus dimasukkan ke dalam genomnya. Mereka adalah, gen untuk protein Repressor Lac (Lac I), daerah operator-proksimal dari Lac Z gen, promotor lac dan situs kloning ganda (polylinker). Saat dsDNA dari M13 digunakan sebagai vektor, itu dapat diperlakukan sebagai vektor plasmid. Namun, penggunaan ssDNA M13 memiliki keuntungan dalam sekuensing DNA dan mutagenesis yang diarahkan ke lokasi.
Karena vektor fag M13 memiliki beberapa situs kloning di Lacz Wilayah, vektor rekombinasi dapat dengan mudah diidentifikasi dengan pemutaran koloni biru/putih pada pelat agar yang mengandung IPTG dan X-GAL. Plak biru yang diproduksi di pelat tidak mengandung fag yang direkombinasi. Oleh karena itu, fag dengan sisipan dapat dipilih untuk tujuan kloning.
Gambar 02: Bakteriofag M13
Apa perbedaan antara vektor fag YAC dan M13?
YAC vs M13 Vektor fag | |
| YAC adalah kromosom yang direkayasa secara genetik yang memiliki kemampuan untuk membawa segmen besar DNA asing dan bereplikasi di dalam sel ragi. | Vektor fag M13 adalah vektor virus yang dikembangkan oleh bakteriofag M13 yang digunakan untuk memasukkan DNA asing ke dalam E coli. |
| Tujuan | |
| YAC dirancang untuk mengklon fragmen besar DNA genom ke dalam ragi. | Vektor fag M13 digunakan untuk memasukkan DNA asing ke dalam E coli. |
| Masukkan panjang | |
| YACS dapat berisi sisipan genomik berukuran megabase (1000 kb - 2000 kb). | Ukuran sisipan sekitar 1.500 bps. |
| Konstruksi | |
| DNA YAC sulit untuk dimurnikan utuh dan membutuhkan konsentrasi tinggi untuk menghasilkan sistem vektor YAC. | Itu terjadi melalui rantai elektron fotosintesis siklik. |
| Stabilitas | |
| YAC tidak stabil. | Fag M13 dapat dengan mudah diekstraksi. |
| Ukuran | |
| Enzim adalah molekul yang lebih besar. | Fag M13 stabil dari YAC. |
Ringkasan - YAC vs M13 FAGE Vektor
YAC adalah sistem vektor yang dibangun secara artifisial menggunakan daerah spesifik kromosom ragi untuk memasukkan segmen besar bahan genetik ke sel ragi. Vektor fag M13 adalah sistem vektor yang berasal dari bakteriofag M 13 yang menggunakan E coli Sebagai organisme tuan rumah. Ini adalah perbedaan utama antara vektor fag YAC dan M13. Keduanya sama -sama berguna dalam teknologi DNA rekombinan dan kloning gen.
Referensi:
1.”Vektor."Genetika -tidak ada - vektor. N.P., N.D. Web. 16 Mei 2017. https: // genetika-notes.wikispaces.com/vektor
2.“Kromosom buatan ragi.”Wikipedia. Wikimedia Foundation, 21 Apr. 2017. Web. 16 Mei 2017. .
Gambar milik:
1. "M13B" oleh J3D3 - Karya Sendiri (CC BY -SA 3.0) Via Commons Wikimedia
