Perbedaan antara Elisa Langsung dan Tidak Langsung
Perbedaan Utama - ELISA Direct vs Tidak Langsung
Immunoassay terkait enzim (ELISA), juga dikenal sebagai enzim immunoassay, adalah tes serologis yang mendeteksi antibodi dalam darah. Ini digunakan sebagai alat diagnostik untuk mengetahui apakah pasien telah terpapar jenis virus tertentu atau agen infeksi lainnya (antigen) dan apakah tubuh telah menghasilkan antibodi terhadap infeksi. Elisa juga dapat mengidentifikasi infeksi masa lalu dan saat ini. Oleh karena itu, ELISA sering digunakan sebagai tes prescreening oleh dokter sebelum analisis penyakit mendalam. Tes ini dapat dilakukan di laboratorium dengan mengambil sampel darah dari pasien. Ada dua jenis tes ELISA: ELISA Langsung dan ELISA tidak langsung. Perbedaan utama antara ELISA langsung dan tidak langsung adalah bahwa ELISA tidak langsung lebih sensitif dan membutuhkan penambahan antibodi sekunder ketika ELISA LANGSUNG kurang sensitif dan hanya menggunakan antibodi primer.
ISI
1. Ikhtisar dan Perbedaan Utama
2. Apa itu Elisa Direct
3. Apa itu Elisa Tidak Langsung
4. Perbandingan berdampingan - ELISA Direct vs Tidak Langsung
5. Ringkasan
Apa itu Elisa Direct?
ELISA adalah tes diagnostik penyakit yang dilakukan untuk mengidentifikasi keberadaan antigen atau antibodi tertentu dalam darah. Itu dilakukan sebagai uji piring. Menggunakan antibodi yang terkait dengan enzim yang mudah diuji. Kehadiran antigen dalam sampel serum mengikat dengan antibodi spesifik yang dihubungkan dengan enzim. Pada langkah terakhir, substrat spesifik ditambahkan untuk bereaksi dengan enzim. Enzim mengubah substrat menjadi produk berwarna atau penghasil sinyal. Perubahan warna dalam substrat kimia mengungkapkan adanya antibodi tertentu dalam sampel serum. Tes ELISA Langsung hanya menggunakan antibodi primer yang terkait dengan enzim. Setelah mengikat antigen, dengan cepat mengubah warna, menunjukkan keberadaan agen infeksi dalam darah. Namun, intensitas sinyal lebih lemah di ELISA langsung karena epitop terbatas pada pengikatan antigen. Oleh karena itu, ELISA langsung kurang sensitif dibandingkan dengan ELISA tidak langsung.
Gambar 01: Tes ELISA Langsung
Apa itu Elisa Tidak Langsung?
ELISA dapat dilakukan dengan menggunakan dua jenis antibodi yaitu; Antibodi primer dan antibodi sekunder. Alat ELISA tidak langsung menggunakan kedua jenis antibodi untuk memperkuat sinyal untuk deteksi yang lebih baik. Teknik ELISA tidak langsung dilakukan sebagai berikut.
- Pelat diinkubasi dengan antigen dan dicuci untuk memblokir pengikatan spesifik.
- Kemudian antibodi primer ditambahkan dan dicuci.
- Antibodi sekunder terkait enzim ditambahkan dan dicuci.
- Substrat ditambahkan dan dibiarkan bereaksi dengan enzim.
- Sinyal terdeteksi, dan ada atau tidak adanya antigen spesifik dalam sampel diidentifikasi.
Dalam uji ELISA tidak langsung, beberapa antibodi sekunder dapat berikatan dengan antibodi primer tunggal. Antibodi sekunder dihubungkan dengan enzim yang mudah diuji. Oleh karena itu, satu ikatan dapat membuat sinyal yang kuat karena lebih dari satu interaksi. Oleh karena itu, ELISA tidak langsung lebih sensitif daripada ELISA langsung. Namun, ELISA tidak langsung dapat membuat sinyal tidak spesifik karena reaksi silang dari antibodi sekunder.
Gambar 02: Tes ELISA Tidak Langsung
Apa perbedaan antara Elisa langsung dan tidak langsung?
Direct vs tidak langsung ELISA | |
| ELISA Langsung kurang sensitif dibandingkan dengan ELISA tidak langsung. | ELISA tidak langsung lebih sensitif. |
| Waktu yang diambil | |
| Tes ELISA Langsung adalah proses cepat. | ELISA tidak langsung memakan waktu. |
| Penggunaan antibodi | |
| Hanya satu jenis antibodi (antibodi primer) yang digunakan dalam ELISA langsung. | Antibodi primer dan sekunder digunakan untuk ELISA tidak langsung. |
| Tautan dengan enzim | |
| Antibodi primer terkait dengan enzim. | Antibodi sekunder dihubungkan dengan enzim. |
| Reaktivitas silang antibodi kedua | |
| Direct ELISA menghilangkan reaktivitas silang antibodi kedua. | ELISA tidak langsung dipengaruhi dengan reaktivitas silang antibodi kedua. |
| Sinyal | |
| Sinyal lemah dibandingkan dengan ELISA tidak langsung. | Sinyal diamplifikasi dalam ELISA tidak langsung. Oleh karena itu, mudah dideteksi. |
Ringkasan -Direct vs tidak langsung ELISA
Elisa adalah teknik biokimia yang digunakan terutama dalam imunologi untuk mendeteksi keberadaan antibodi atau antigen dalam sampel darah pasien. Itu dapat dilakukan melalui dua proses yang dikenal sebagai ELISA langsung atau tidak langsung. Tes ELISA langsung hanya menggunakan antibodi primer untuk mendeteksi antigen sementara ELISA tidak langsung menggunakan antibodi primer dan sekunder. Dalam ELISA langsung, antibodi primer diberi label sedangkan pada antibodi sekunder ELISA tidak langsung diberi label. Ini adalah perbedaan antara ELISA langsung dan tidak langsung.
Referensi
1.“Immunosorbent Assay (ELISA) yang terhubung dengan enzim.Buletin Organisasi Kesehatan Dunia. U.S. National Library of Medicine, 1976. Web. 29 mar. 2017
2. Loon, a. M van, J. T van der logt, f. W. Heessen, dan j. Van der Veen. “Uji imunosorben yang terkait dengan enzim yang menggunakan antigen berlabel untuk mendeteksi imunoglobulin M dan antibodi dalam toksoplasmosis: perbandingan dengan imunofluoresensi tidak langsung dan uji imunosorben yang terkait dengan enzim ganda enzim ganda enzim ganda sandwich ganda ganda.Jurnal Mikrobiologi Klinis. U.S. Perpustakaan Kedokteran Nasional, Juni 1983. Web. 29 mar. 2017
Gambar milik:
1. "ELISA Diagram" oleh Cavitri - karya sendiri (CC oleh 3.0) Via Commons Wikimedia
2. "Tidak Langsung Elisa" oleh Cawang - karya sendiri (CC0) via Commons Wikimedia
