Perbedaan antara transfeksi transien dan stabil
Perbedaan utama - transfeksi transien vs stabil
Transfeksi adalah proses yang terlibat dalam transfer gen sel eukariotik menggunakan metode kimia atau fisik. Transfeksi dapat diklasifikasikan ke dalam dua jenis utama bernama transfeksi transien dan transfeksi yang stabil. Selama transfeksi sementara, gen yang menarik gagal untuk diintegrasikan dengan genom host dan diekspresikan sementara dalam inang untuk jangka pendek sedangkan, dalam transfeksi yang stabil, gen yang diintegrasikan dengan genom host dan dipertahankan untuk jangka panjang dalam beberapa generasiS. Ini adalah perbedaan utama antara transfeksi sementara dan stabil. Dalam kedua kasus tersebut, transfeksi berhasil, dan gen diekspresikan.
ISI
1. Ikhtisar dan Perbedaan Utama
2. Apa itu transfeksi sementara
3. Apa itu transfeksi yang stabil
4. Perbandingan berdampingan - transfeksi transien vs stabil
5. Ringkasan
Apa itu transfeksi sementara?
Transfeksi adalah alat penting untuk memasukkan gen ke dalam sel eukariotik. Di antara dua jenis transfeksi, transfeksi sementara adalah cara umum dalam transfer gen. Melalui vektor, gen asing ditransformasikan di dalam sel inang. Setelah DNA asing memasuki sel inang, ia memiliki dua opsi. Itu dapat berintegrasi dengan genom host dan mereplikasi, atau tetap di dalam tanpa berintegrasi ke dalam genom. Transfeksi sementara menunjukkan ekspresi sementara gen yang dimasukkan tanpa berintegrasi ke dalam genom host. Gen mengekspresikan dan menghasilkan protein kode sampai sel terbagi. Namun, karena ketidakmampuan integrasi, ia tidak dapat mereplikasi dan masuk ke generasi mendatang. Jenis transfeksi ini berhasil untuk periode waktu yang singkat. Selama pembelahan sel atau karena beberapa faktor lain, DNA asing mengalami degradasi. Transfeksi sementara ditunjukkan ketika DNA asing dalam bentuk DNA yang sangat melingkar.
Gambar 01: Transfeksi sementara
Apa itu transfeksi yang stabil?
Transfeksi yang stabil menunjukkan integrasi gen asing yang sukses ke dalam genom host. Begitu DNA asing masuk ke dalam sel inang, bagian dari DNA asing terintegrasi dengan genom host dan menjadi bagian darinya. Oleh karena itu, DNA asing juga mereplikasi dan masuk ke generasi mendatang ketika genom host mereplikasi. Jenis transfeksi ini kompleks dan langka. Namun, karena transfeksi yang stabil ke dalam genom, sifat ini dipertahankan untuk periode yang lebih lama dari beberapa generasi.
Transfeksi yang stabil adalah proses yang sulit dan membutuhkan pengiriman DNA yang efektif dan perolehan sel DNA asing ke dalam genomnya. Oleh karena itu, DNA linier mendukung transfeksi yang stabil daripada DNA melingkar. Namun, laju transfeksi yang stabil sekitar satu dari 104 sel yang ditransformasikan. Transfeksi yang stabil dapat diamati dengan cotransfomation dari penanda yang dapat dipilih dan melakukan seleksi buatan pada media.
Gambar 02: Transfeksi yang stabil
Apa perbedaan antara transfeksi sementara dan stabil?
Transfeksi transien vs stabil | |
| DNA asing tidak berintegrasi ke dalam genom host. | DNA asing terintegrasi dengan genom host dan menjadi bagian darinya. |
| Replikasi di dalam host | |
| Gen yang ditransfeksi secara sementara tidak mereplikasi di dalam host. Oleh karena itu gen tidak diteruskan ke generasi berikutnya. | Gen direplikasi di dalam host dan diteruskan ke generasi mendatang. |
| Durasi waktu ekspresi gen | |
| Gen diekspresikan untuk periode waktu yang terbatas dan setelah itu, mereka dihancurkan. | Gen menjadi bagian dari genom dan diekspresikan dalam generasi untuk jangka waktu yang lama. |
| Menggunakan | |
| Ini berguna untuk mempelajari efek ekspresi jangka pendek dari gen atau produk gen. | Ini berguna untuk mempelajari efek ekspresi gen jangka panjang. |
| Deteksi transfeksi | |
| Gen diekspresikan dan dapat dengan mudah terdeteksi dengan memasukkan gen reporter. | Transfeksi yang stabil dapat dengan mudah dideteksi dengan memasukkan penanda yang dapat dipilih dan memilih melalui seleksi buatan di media. |
| Kejadian dan proses | |
| Transfeksi sementara adalah umum dan tidak rumit untuk dilakukan. | Transfeksi stabil jarang terjadi dan kompleks untuk dilakukan. |
| Sifat DNA | |
| DNA yang sangat supercoiled cocok untuk transfeksi sementara. | DNA linier cocok untuk transfeksi yang stabil. |
| Aplikasi | |
| Ini digunakan untuk studi knockdown gen atau pembungkaman dengan RNA penghambatan, produksi protein dalam skala kecil | Ini digunakan untuk produksi protein pada studi farmakologi skala besar, terapi gen, penelitian tentang mekanisme regulasi genetik jangka panjang |
Ringkasan -Transien vs Transfeksi Stabil
Transfeksi transien dan stabil adalah dua jenis transeksi yang ditunjukkan selama gen yang ditransfer ke sel eukariotik oleh sistem berbasis non-viral. DNA asing yang ditransformasikan tidak terintegrasi dengan genom host dalam transfeksi sementara saat terintegrasi dengan genom host dalam transfeksi yang stabil. DNA melingkar melingkar ditunjukkan transfeksi sementara sedangkan DNA linier lebih suka transfeksi yang stabil. Ini adalah perbedaan antara transfeksi sementara dan stabil. Namun transfeksi sementara lebih umum dan mudah dibandingkan dengan transfeksi yang stabil. Tetapi pemilihan satu di antara dua tergantung pada tujuan transfer gen dan durasi proyek penelitian.
Referensi:
1. Condreay, j. Patrick, Sam M. Witherspoon, William C. Clay, dan Thomas A. Kost. “Ekspresi gen sementara dan stabil dalam sel mamalia ditransduksi dengan vektor baculovirus rekombinan."Prosiding Akademi Ilmu Pengetahuan Nasional Amerika Serikat. Akademi Ilmu Pengetahuan Nasional, 05 Jan. 1999. Web. 25 Mar. 2017
2. Kim, Tae Kyung, dan James H. Eberwine. “Transfeksi sel mamalia: masa kini dan masa depan.Kimia analitik dan bioanalitik. Springer-Verlag, Agustus. 2010. Web. 25 Mar. 2017
