Apa perbedaan antara ELISA dan ELISPOT

Itu perbedaan utama Antara Elisa dan Elispot adalah itu ELISA adalah uji imunosorben yang terkait dengan enzim yang menentukan konsentrasi total protein pensinyalan yang disekresikan, sedangkan ELISPOT adalah uji imunosorben yang terkait dengan enzim yang mendeteksi sel yang mensekresi sitokin individu individu.

ELISA dan ELISPOT adalah dua tes immunosorbent terkait enzim yang banyak digunakan dalam kedokteran, patologi tanaman, bioteknologi dan industri farmasi yang berbeda. Dalam teknik ini, analit protein terdeteksi oleh antibodi yang diarahkan terhadapnya. ELISA adalah uji immunosorbent terkait enzim paling populer yang digunakan di laboratorium. Di sisi lain, ELISPOT adalah uji immunosorbent terkait enzim yang tidak digunakan sebagai ganti ELISA melainkan digunakan selain ELISA di laboratorium.

ISI

1. Ikhtisar dan Perbedaan Utama
2. Apa itu Elisa
3. Apa itu Elispot
4. Kesamaan - Elisa dan Elispot
5. Elisa vs Elispot dalam bentuk tabel
6. Ringkasan - Elisa vs Elispot

Apa itu uji elit?

ELISA adalah uji imunosorben terkait enzim yang menentukan konsentrasi total protein pensinyalan yang disekresikan. Ini adalah uji biokimia analitik yang banyak digunakan yang pertama kali dijelaskan oleh Engvall dan Perlmann pada tahun 1971. Teknik ini menggunakan jenis fase padat enzim immunoassay untuk mendeteksi keberadaan protein spesifik dalam sampel cair menggunakan antibodi yang diarahkan terhadap protein spesifik ini. Uji ini adalah alat diagnostik yang umum digunakan dalam kedokteran, patologi tanaman dan bioteknologi.

Mekanisme Tes ELISA

Dalam sebagian besar uji ELISA, jumlah antigen yang tidak diketahui diimobilisasi ke dukungan padat (pelat mikro) di awal. Maka antibodi primer yang cocok diterapkan pada permukaan pendukung padat. Antibodi ini membentuk kompleks dengan antigen (kompleks antigen-antibodi). Antibodi primer terikat antigen dapat dideteksi dengan antibodi sekunder yang terkait dengan enzim melalui biokonjugasi. Pada langkah terakhir dari uji ELISA, suatu zat yang mengandung substrat enzim ditambahkan. Jika ada ikatan yang tepat dari antibodi primer ke antigen, perubahan warna yang terdeteksi dihasilkan oleh substrat. Pada akhirnya, ini mengukur antigen dalam sampel.

Gambar 01: Berbagai jenis ELISA

Selain itu, ada berbagai pendekatan untuk ELISA, seperti ELISA langsung dan ELISA tidak langsung. Saat ini, berbagai tes ELISA digunakan untuk mendeteksi patogen manusia seperti Mycobacterium tuberculosis, virus rotavirus, virus hepatitis B, virus hepatitis C, produksi enterotoksin E.coli, HIV, dan SARS-COV-2.

Apa itu uji elispot?

ELISPOT adalah uji imunosorben terkait enzim yang mendeteksi sel yang mensekresi sitokin individu. Cecil Czerkinsky pertama kali menggambarkan ELISPOT pada tahun 1983. Ini adalah jenis pengujian yang berfokus pada pengukuran kuantitatif frekuensi sekresi sitokin untuk satu sel tunggal. Ini juga diklasifikasikan sebagai teknik yang menggunakan antibodi untuk mendeteksi analit protein biologis atau kimia. Uji Fluorospot adalah variasi dari uji ELISPOT, yang menggunakan fluoresensi untuk menganalisis beberapa analit (protein yang lebih rahasia).

Mekanisme Tes ELISPOT

Dalam mekanisme ini, antibodi monoklonal spesifik sitokin ditambahkan ke sumur pelat mikro pada awalnya. Kemudian sel yang diinginkan yang diamati ditambahkan ke sumur. Nanti, sel diinkubasi. Selama inkubasi sel, sel dibiarkan bereaksi terhadap rangsangan dan mengeluarkan sitokin apa pun. Sitokin yang telah disekresikan oleh sel -sel yang diinkubasi akan menempel pada antibodi karena sel -sel dikelilingi oleh antibodi monoklonal spesifik sitokin.

Gambar 02: ELISPOT USAY

Untuk mendeteksi antibodi monoklonal spesifik sitokin ini, antibodi deteksi spesifik yang terbiotinilasi ditambahkan ke dalam sumur. Antibodi deteksi spesifik yang terbiotinilasi menangkap antibodi monoklonal spesifik sitokin di sumur. Selain itu, konjugat streptavidin-enzim ditambahkan ke sumur untuk mengikat dengan antibodi deteksi. Pada langkah terakhir, substrat spesifik ditambahkan ke sumur. Reaksi konjugat dan substrat enzim menghasilkan bintik -bintik yang berbeda di sumur. Bintik -bintik yang berbeda ini dibaca pada pembaca ELISPOT otomatis. Pada akhirnya, ini selanjutnya akan menghitung frekuensi sekresi sitokin.

Apa kesamaan antara elisa dan elispot?

• Keduanya adalah tes immunosorbent terkait enzim.
• Kedua tes mendeteksi analit protein tertentu.
• Tes ini menggunakan antibodi spesifik untuk mengidentifikasi analit protein.
• Kedua tes menggunakan enzim dan substrat.
• Mereka digunakan sebagai alat diagnostik di laboratorium medis.

Apa perbedaan antara ELISA dan ELISPOT?

ELISA adalah uji imunosorben terkait enzim yang menentukan konsentrasi total protein pensinyalan yang disekresikan. Di sisi lain, ELISPOT adalah uji immunosorbent terkait enzim yang mengukur sel-sel sekresi sitokin individu. Jadi, ini adalah perbedaan utama antara ELISA dan ELISPOT. Selain itu, dalam tes ELISA, antigen pertama kali diimobilisasi ke sumur mikroliter. Sebaliknya, dalam uji ELISPOT, antibodi pertama kali diimobilisasi ke sumur mikroliter. Dengan demikian, ini adalah perbedaan lain antara ELISA dan ELISPOT.

Infografis di bawah ini menyajikan analisis terperinci tentang perbedaan antara ELISA dan ELISPOT dalam bentuk tabel.

Ringkasan -Elisa vs Elispot

ELISA dan ELISPOT adalah dua tes immunosorbent terkait enzim yang banyak digunakan dalam kedokteran, patologi tanaman, bioteknologi, dan industri farmasi yang berbeda. ELISA mendeteksi keberadaan ligan (protein) dalam sampel cair menggunakan antibodi yang diarahkan terhadap ligan yang akan diukur. ELISPOT Uji adalah metode yang banyak digunakan untuk memantau respons imun. Ini mendeteksi sel -sel sekresi sitokin individu menggunakan antibodi. Ini adalah teknik immunoassay dan bioassay. Dengan demikian, ini adalah ringkasan perbedaan antara ELISA dan ELISPOT.

Referensi:

1. Horlock, Claire. “Immunosorbent Assay (ELISA) terkait enzim.”Masyarakat Imunologi Inggris.
2. “Elispot.“Topik ScienceDirect.

Gambar milik:

1. "Jenis ELISA" oleh Allan.Richard5093 - Karya Sendiri (CC BY -SA 4.0) Via Commons Wikimedia
2. "ELISPOT -EN" oleh Dadofbeanandbug - File ini berasal dari: ELISPOT.PNG (CC BY-SA 3.0) Via Commons Wikimedia