Perbedaan antara kultur sel primer dan sekunder

Perbedaan utama - kultur sel primer vs sekunder
 

Sebelum membahas perbedaan antara kultur sel primer dan sekunder, mari kita pertama kali mendefinisikan kultur sel secara singkat apa itu. Kultur sel adalah proses menghilangkan sel dari hewan atau tumbuhan dan pertumbuhan selanjutnya dalam lingkungan yang dikendalikan secara artifisial. Sel -sel dapat secara langsung dihilangkan dari jaringan dan dipisahkan dengan metode enzimatik atau mekanis atau dapat diturunkan dari kultur yang telah ditetapkan. Perbedaan utama antara kultur sel primer dan sekunder adalah itu Sel untuk kultur sel primer diperoleh langsung dari jaringan hewan atau tanaman, ketika Sel untuk kultur sel sekunder diperoleh dari kultur primer yang sudah mapan. Oleh karena itu, budaya sekunder adalah budaya baru yang berasal dari budaya utama.

Mari kita lihat lebih jauh ke dalam arti kultur sel primer dan sekunder untuk membedakan mereka dengan lebih baik.

Apa kultur sel primer?

Kultur sel primer adalah disasosiasi sel dari hewan induk atau jaringan tanaman melalui tindakan enzimatik atau mekanis dan mempertahankan pertumbuhan sel dalam substrat yang sesuai dalam kaca atau wadah plastik dalam kondisi lingkungan yang terkontrol. Sel dalam kultur primer memiliki kariotipe yang sama (jumlah dan penampilan kromosom dalam nukleus sel eukariotik) seperti sel -sel dalam jaringan asli. Kultur sel primer dapat diklasifikasikan menjadi dua berdasarkan jenis sel yang digunakan dalam kultur.

• Anchorage tergantung atau sel yang patuh - Sel -sel ini membutuhkan keterikatan untuk pertumbuhan. Sel -sel yang melekat biasanya berasal dari jaringan organ, misalnya dari ginjal di mana sel -sel tidak bergerak dan tertanam dalam jaringan ikat.

• Anchorage Independent atau Suspension Cells -Sel -sel ini tidak memerlukan keterikatan untuk pertumbuhan. Dengan kata lain, sel -sel ini tidak melekat pada permukaan pembuluh kultur. Semua kultur suspensi berasal dari sel sistem darah; Misalnya, limfosit sel darah putih ditangguhkan dalam plasma.

Sel yang berasal dari kultur primer memiliki rentang hidup yang terbatas. Sel tidak dapat diadakan tanpa batas waktu karena beberapa alasan. Meningkatkan jumlah sel dalam kultur primer akan menyebabkan kelelahan substrat dan nutrisi. Juga, aktivitas seluler secara bertahap akan meningkatkan tingkat metabolit toksik dalam kultur yang menghambat pertumbuhan sel lebih lanjut.

Pada tahap ini, subkultur sekunder atau harus dilakukan untuk memastikan pertumbuhan sel yang berkelanjutan.

Apa itu kultur sel sekunder?

Seperti dijelaskan di atas, ketika sel -sel dalam kultur yang patuh menempati semua substrat yang tersedia atau ketika sel -sel dalam kultur suspensi melampaui kapasitas media untuk mendukung pertumbuhan lebih lanjut, proliferasi sel mulai mengurangi atau sepenuhnya berhenti berhenti. Untuk mempertahankan kepadatan sel yang optimal untuk pertumbuhan yang berkelanjutan dan untuk merangsang proliferasi lebih lanjut, kultur primer harus disubkultur. Proses ini dikenal sebagai kultur sel sekunder.

Selama kultur sel sekunder, sel -sel dari kultur primer ditransfer ke kapal baru dengan media pertumbuhan segar. Proses ini melibatkan menghilangkan media pertumbuhan sebelumnya dan memisahkan sel -sel yang melekat pada kultur primer yang melekat. Kultur sel sekunder secara berkala diperlukan untuk menyediakan sel dengan ruang yang tumbuh dan nutrisi segar, dengan demikian, memperpanjang kehidupan sel dan memperluas sejumlah sel dalam kultur.

Kultur sekunder volume kultur primer tertentu ke dalam volume yang sama dari media pertumbuhan segar memungkinkan pemeliharaan garis sel jangka panjang. Kultur sekunder menjadi volume media pertumbuhan segar yang lebih besar dipraktikkan untuk meningkatkan jumlah sel, misalnya dalam proses industri atau percobaan ilmiah.

Apa perbedaan antara kultur sel primer dan kultur sel sekunder?

Seperti yang sekarang kami pahami dua istilah secara terpisah, kami akan membandingkan keduanya untuk menemukan perbedaan lain di antara mereka.

Kapan menggunakan kultur sel primer dan/atau sekunder

Ini tergantung pada apa yang ingin Anda pelajari dan jenis eksperimen apa yang Anda lakukan.

Kultur sel primer: Ini adalah proses yang akan digunakan untuk kultur sel dari jaringan orang tua yang menjadi perhatian. Sel dalam kultur primer akan memiliki umur yang terbatas karena kelelahan substrat dan nutrisi dan penumpukan racun, dengan pertumbuhan populasi. Kultur primer, terlepas dari teknik pemisahan yang digunakan dalam proses isolasi, mungkin mengandung beberapa jenis sel. Namun, ini mungkin bukan masalah dalam semua jenis percobaan dan dalam hal ini budaya primer saja dapat digunakan.

Kultur sel sekunder:  Biasanya, jumlah sel yang diperoleh dari kultur primer tidak cukup dalam percobaan. Kultur sel sekunder memberikan kesempatan untuk memperluas populasi sel dan juga, memperpanjang rentang hidup. Ini memungkinkan pemilihan sel lebih lanjut dengan penggunaan media selektif dan memungkinkan keseragaman genotipik dan fenotipik dalam populasi. Proses ini digunakan untuk menghasilkan kultur ulangan untuk karakterisasi dasar, pelestarian, dan eksperimen.

Kemiripan dengan jaringan orang tua

Kultur sel primer: Sel untuk kultur sel primer secara langsung diperoleh dari jaringan hewan atau tanaman. Oleh karena itu, sel -sel dalam kultur primer sangat mirip dengan jaringan orangtentalnya dan karenanya, respons biologis mungkin lebih dekat dengan situasi in vivo daripada kultur sel sekunder.

Kultur sel sekunder: Kultur sel sekunder berasal dari kultur sel primer. Meskipun sub-kultur memperpanjang umur sel, ada kemungkinan bahwa setelah beberapa fase, sel mungkin diubah atau mungkin kehilangan kendali karena tidak membagi lebih dari beberapa kali tertentu. Ini bisa karena mutasi atau perubahan genetik pada sel primer selama sub-budaya. Misalnya, beberapa mikroorganisme cenderung beradaptasi dengan kondisi budaya, yang sebagian besar berbeda dari lingkungan alami mereka, dengan mengubah biologi mereka.

Proses kultur - memperoleh sel

Kultur sel primer: Dalam kultur sel primer, jaringan hewan atau tumbuhan akan melalui fase pembilasan, diseksi, dan disagregasi mekanis atau enzimatik. Jaringan terpilah akan mengandung berbagai jenis sel yang berbeda, dan ini mungkin memerlukan adopsi teknik pemisahan untuk mengisolasi sel yang menarik.

Kultur sel sekunder: Dalam kultur sel sekunder, jika kultur primer adalah kultur yang patuh, langkah pertama adalah melepaskan sel dari perlekatan (permukaan pembuluh kultur) dengan cara mekanik atau enzimatik. Kemudian, sel harus dilepas satu sama lain untuk membentuk suspensi sel tunggal.

Jumlah sel dalam kultur

Kultur sel primer: Tidak diinginkan untuk memiliki suspensi sel tunggal absolut, karena banyak sel primer bertahan lebih baik dalam kelompok kecil.

Kultur sel sekunder: Cukup untuk menghasilkan suspensi sel tunggal.

Rentang Budaya Hidup

Kultur sel primer: Kultur sel primer memiliki rentang kehidupan yang terbatas. Seperti yang dijelaskan di atas, ini karena pertumbuhan sel menghabiskan substrat dan nutrisi dan menyebabkan akumulasi metabolit toksik beracun. Akibatnya, secara bertahap laju pertumbuhan sel turun, yang menyebabkan kematian sel.

Kultur sel sekunder: Kultur sel sekunder memperpanjang umur sel. Sub-kultur periodik dapat menghasilkan sel-sel abadi melalui transformasi atau perubahan genetik sel primer.

Risiko kontaminasi

Kultur sel primer: Kultur sel primer lebih sulit untuk diurus. Secara umum, kultur sel primer membutuhkan campuran asam amino yang kaya, mikronutrien, hormon tertentu dan faktor pertumbuhan. Akibatnya, risiko kontaminasi dalam kultur sel primer lebih tinggi dari kultur sel sekunder.

Kultur sel sekunder: Kultur sel sekunder relatif mudah dipelihara, dan risiko kontaminasi lebih rendah dari kultur sel primer.

Dalam artikel ini, kami telah berusaha memahami istilah kultur sel primer dan kultur sel sekunder diikuti dengan perbandingan untuk menyoroti perbedaan utama di antara mereka. Perbedaan dasar terletak pada bagaimana sel berasal dari kultur; Sel untuk kultur sel primer diperoleh langsung dari jaringan hewan atau tanaman, sedangkan sel untuk kultur sel sekunder diperoleh dari kultur primer yang sudah mapan.

Referensi: Dasar -Dasar Kultur Sel - Buku Pegangan oleh Invitrogen dan Gibco Freshney, R. SAYA. (2006). Prinsip dasar kultur sel. Pusat Onkologi dan Farmakologi Terapan.   Gambar milik: “Budaya Sel” oleh Umberto Salvagnin (CC oleh 2.0) Via Flickr