Perbedaan antara fusi dan Taq polimerase

Perbedaan utama - Phusion vs Taq Polimerase
 

DNA polimerase banyak digunakan enzim dalam teknik biologi molekuler dan juga secara alami hadir di semua organisme yang mengalami replikasi DNA. Mereka adalah enzim polimerisasi utama yang melibatkan selama replikasi. DNA polimerase mampu menambahkan nukleotida ke ujung 3 'untai DNA bebas sehingga menyebabkan perpanjangan untai baru. Saat ini, karena perkembangan biologi molekuler dalam diagnostik penyakit dan aplikasi industri, penting untuk memproduksi polimerase yang memiliki berbagai sifat menguntungkan. Ini meningkatkan keakuratan metode dan menjadikannya teknik yang lebih cepat. Fusi dan Taq polimerase adalah dua enzim polimerase termostabil yang diproduksi secara komersial yang digunakan dalam aplikasi molekuler khusus. Fusi adalah DNA polimerase yang diisolasi Pyrococcus furiosus dan terutama digunakan dalam percobaan kloning untuk meningkatkan kesetiaan. TAQ DNA polimerase adalah standar DNA polimerase yang digunakan dalam reaksi rantai polimerase (PCR), dan diisolasi dari bakteri termostabil; Thermus aquaticus. Itu perbedaan utama Di antara dua enzim adalah sumber mikroorganisme. Fusi diisolasi dari ekstremofil, Pyrococcus furiosus Sedangkan, Taq polimerase diisolasi dari termofil, Thermus aquaticus.

ISI

1. Ikhtisar dan Perbedaan Utama
2. Apa itu fusi
3. Apa itu Taq Polymerase
4. Kesamaan antara fusi dan Taq polimerase
5. Perbandingan berdampingan - fusi vs taq polimerase dalam bentuk tabel
6. Ringkasan

Apa itu fusi?

Fusi DNA polimerase adalah polimerase baru yang diproduksi dengan mengisolasi enzim dari Pyrococcus furiosus, yang merupakan archaea ekstremofilik. Mikroba ini berada dalam kondisi suhu yang sangat tinggi, sehingga membuat polimerase menjadi polimerase yang sangat panas. Fusion polimerase digunakan untuk mendapatkan kesetiaan ekstrem atas polimerase termostabil konvensional; Taq polimerase. Fusion polimerase mampu memperkuat templat panjang hingga 7.5kb DNA genomik. Kapasitas polimerisasi optimal fusi polimerase adalah pada 72⁰ C. Fusi juga digunakan dalam produk kloning untuk pengurutan, analisis ekspresi dan analisis mutasi.

Fusi DNA polimerase memiliki aktivitas eksonuklease 3 ' - 5'. Ini memungkinkan proofreading untai yang baru disintesis setelah sintesis. Oleh karena itu, ketidakcocokan nukleotida mudah diperbaiki. Dengan demikian, ia memiliki tingkat kesalahan yang lebih rendah. Keunggulan keseluruhan fusi polimerase adalah;

• Kesetiaan yang ekstrem
• Kecepatan tinggi dan waktu ekstensi berkurang
• Reaksi yang kuat dan membutuhkan optimasi minimal
• Hasil tinggi

Gambar 01: Fusi

Kerugian utama dari fusi polimerase adalah bahwa ia dihambat di hadapan deoxyuridine triphosphate (DUTP). Ketika DUTP diakumulasikan dalam campuran reaksi, itu dapat menghambat tindakan fusi polimerase. Ini dicegah dengan mengobati campuran reaksi dengan dutpase sebelum menambahkan enzim. Saat ini, varian resisten DUTP dari fusi polimerase yang dikenal sebagai PFU turbo digunakan sebagai pengganti fusi polimerase sebagai obat untuk masalah ini.

Apa itu Taq Polymerase?

TAQ DNA polimerase Penemuan telah merevolusi bidang biologi molekuler. Itu memecahkan masalah besar dalam amplifikasi DNA. Taq DNA polimerase adalah enzim polimerase panas yang diekstraksi dan diisolasi dari bakteri termofilik, Thermus aquaticus. Penemuan enzim ini mengarah pada pengembangan PCR. Enzim ini telah memungkinkan penggunaan reaksi berantai polimerase dalam amplifikasi DNA alih -alih teknik kloning yang melelahkan konvensional. PCR sekarang digunakan dalam diagnostik molekuler, bidang pertanian dan industri dengan banyak variasi baru yang ditambahkan ke teknik ini.

Gambar 02: Taq polimerase

Fungsi TAQ DNA polimerase pada kisaran suhu optimal antara 72⁰C - 80⁰C. TAQ DNA polimerase membutuhkan co-factor; Magnesium untuk fungsinya. Taq polimerase tidak memiliki kemampuan proofreading 3 ' - 5', oleh karena itu, tingkat kesalahan Taq DNA polimerase tinggi dibandingkan dengan jenis polimerase DNA yang lebih baru seperti fusi polimerase dll. Namun, popularitas Taq DNA polimerase tetap sama di seluruh dunia sains karena kenyamanan dan fleksibilitas enzim.

Apa kesamaan antara fusi dan taq polimerase?

• Enzim fusi dan taq polimerase adalah enzim polimerisasi yang mampu menambahkan nukleotida ke ujung bebas 3 'untai DNA.
• Baik fusi dan Taq polimerase membutuhkan urutan primer untuk memulai polimerisasi.
• Baik fusi dan Taq polimerase stabil panas.
• Fusi dan Taq polimerase digunakan dalam mekanisme PCR untuk memperkuat DNA.
• Saat menambahkan polimerase ke dalam campuran reaksi, baik fusi dan Taq polimerase ditambahkan terakhir untuk memastikan efisiensi enzim.
• Baik fusi dan Taq polimerase disintesis secara komersial untuk tujuan eksperimental biologi molekuler.
• Baik fusi dan Taq polimerase membutuhkan kofaktor untuk menyelesaikan fungsinya.

Apa perbedaan antara fusi dan Taq polimerase?

Ringkasan - Fusion vs Taq polimerase

Fusi dan Taq DNA polimerase adalah dua polimerase stabil panas yang digunakan dalam teknik PCR. Fusi adalah polimerase yang diisolasi dari ekstremofil, Pyrococcus furiosus sedangkan Taq diisolasi dari bakteri termostabel Thermus aquaticus. Penemuan TAQ DNA Polymerase mengarah pada penemuan PCR. Fusi memiliki banyak keunggulan dibandingkan taq yang telah menjadikan fusi sebagai pilihan yang lebih baik dalam menghasilkan DNA kesetiaan tinggi. Namun, Taq polimerase masih digunakan sebagai enzim polimerase standar dalam PCR. Inilah perbedaan antara fusi dan Taq polimerase.

Referensi:

1.Biolabs, New England. “Taq DNA polimerase.”New England Biolabs: Reagents for the Life Sciences Industry. Tersedia disini  
2.“Fusi DNA polimerase.Biolab New England. Tersedia disini 

Gambar milik:

1.'Gam diilustrasikan oleh Nivin Nasri'by Nivinn - karya sendiri, (CC BY -SA 4.0) Via Commons Wikimedia  
2.'Taq'by Adenosine - Karya Sendiri, (CC BY -SA 3.0) Via Commons Wikimedia