Itu perbedaan utama Antara radioimmunoassay dan uji imunoradiometri adalah bahwa dalam radioimmunoassay, sampel atau senyawa yang akan diukur dikombinasikan dengan antigen radioaktif sebelum kombinasi, sedangkan dalam uji imunoradiometri, sampel atau senyawa segera bergabung dengan antibodi radiolabeled.
Immunoassay adalah tes biokimia yang mendeteksi keberadaan atau konsentrasi makromolekul dalam larutan menggunakan antibodi atau antigen. Antibodi fluoresen dan radioaktif digunakan untuk mengukur antigen dalam sampel. Awalnya, antibodi digunakan dalam teknik presipitasi seperti imunopresipitasi, imunodiffusi dan imun-elektroforesis untuk analisis protein serum. Saat ini, teknik yang sangat sensitif seperti radioimmunoassay dan uji imunoradiometrik digunakan untuk pengukuran obat, penanda tumor, dan hormon.
1. Ikhtisar dan Perbedaan Utama
2. Apa itu uji radioimmunoassay
3. Apa itu uji imunoradiometri
4. Kesamaan - Radioimmunoassay dan uji imunoradiometri
5. Radioimmunoassay vs uji imunoradiometri dalam bentuk tabel
6. Ringkasan - Radioimmunoassay vs Imunoradiometric Assay
Radioimmunoassay (RIA) adalah immunoassay yang menggunakan elemen radioaktif pembentukan kompleks antigen-antibodi bertahap. RIA biasanya menggunakan antibodi radioaktif untuk mendeteksi jumlah antigen dalam sampel. RIA adalah yang sangat spesifik dan sangat sensitif in vitro pengujian kadar logam. Prinsip di balik RIA adalah ikatan kompetitif. Di sini, antigen radioaktif bersaing melawan antigen non-radioaktif untuk sejumlah antibodi atau situs pengikatan reseptor konstan. RIA membutuhkan lisensi khusus dan tindakan pencegahan karena zat radioaktif digunakan, dan tetap di antara teknik yang paling murah.
Gambar 01: Immunoassay
Selama RIA, sejumlah antigen yang diketahui dibuat radioaktif dengan memberi label dengan isotop gamma-radioaktif dari yodium yang melekat pada tirosin. Maka antigen ini dikombinasikan dengan jumlah antibodi yang diketahui. Di sini, baik antigen dan antibodi secara khusus berikatan satu sama lain. Kemudian, sampel serum darah ditambahkan untuk memulai reaksi kompetitif antara antigen berlabel dan antigen yang tidak berlabel dalam serum dengan antibodi spesifik. Dalam reaksi ini, antibodi melepaskan sejumlah antigen berlabel tertentu. Kuantitas ini sebanding dengan rasio berlabel dan antigen yang tidak berlabel. Akhirnya, kurva pengikat dihasilkan untuk mendapatkan jumlah antigen dalam serum darah pasien.
Immunoradiometric Assay (IRMA) adalah immunoassay yang menggunakan antibodi radiolabeled. Di Irma, antibodi diberi label menggunakan radioisotop. Antibodi ini berikatan dengan antigen yang ada dalam sampel tertentu. Dalam sampel positif, antibodi yang secara radioaktif berlabel mengikat ke epitop antigen gratis. Ini membentuk kompleks antigen-antibodi.
Selama reaksi kedua, antibodi berlabel yang tidak terikat dihilangkan menggunakan antigen fase padat. Jumlah antibodi radioaktif yang tersisa dalam larutan adalah fungsi langsung dari konsentrasi antigen. Irma dikenal sebagai uji reagen berlebih di mana jumlah antibodi radiolabeled berlebih digunakan sebagai reagen. Di sini, kelebihan konsentrasi antibodi berlabel atau antigen diizinkan untuk bereaksi. Sebagai langkah terakhir, antibodi yang terikat antigen dan bebas dipisahkan, dan fraksi terikat antigen mengalami uji radioaktif. Di sini, aktivitas fraksi berbanding lurus dengan konsentrasi antigen.
Radioimmunoassay adalah immunoassay yang menentukan kadar antibodi dengan antigen yang diberi label dengan radioisotop sementara uji imunoradiometri adalah uji reagen berlebih yang menggunakan konsentrasi antibodi radiolabeled berlebihan. Dengan demikian, ini adalah perbedaan utama antara radioimmunoassay dan uji imunoradiometri. Irma mampu memberikan sensitivitas yang lebih tinggi daripada RIA. Dalam RIA, antigen diberi label dengan isotop yodium gamma-radioaktif saat dalam antibodi IRMA, diberi label menggunakan isotop yodium. Jadi, ini juga perbedaan antara radioimmunoassay dan uji imunoradiometri. Karena Irma adalah teknik reagen berlebih, pengujian dilakukan dalam waktu yang lebih singkat dari RIA.
Tabel berikut merangkum perbedaan antara radioimmunoassay dan uji imunoradiometri.
Radioimmunoassay adalah immunoassay yang menggunakan elemen radioaktif dalam pembentukan bertahap untuk menentukan tingkat antibodi. RIA biasanya menggunakan antibodi radioaktif. Antigen radioaktif bersaing melawan antigen non-radioaktif untuk sejumlah antibodi atau situs pengikatan reseptor yang konstan. Uji imunoradiometri adalah immunoassay yang dilakukan untuk menentukan kadar antigen sampel menggunakan antibodi radiolabeled. Antibodi ini berikatan dengan antigen yang ada dalam sampel tertentu. Di akhir setiap pengujian, kompleks antigen-antibodi terbentuk. Untuk mendapatkan hasil pengujian, kurva pengikat ditarik. Dalam radioimmunoassay, kuantitas antigen berlabel sebanding dengan rasio berlabel antigen yang tidak berlabel, tetapi dalam uji imunoradiometri, aktivitas fraksi terikat antigen berbanding lurus dengan konsentrasi antigen. Ini adalah ringkasan perbedaan antara radioimmunoassay dan uji imunoradiometri.
1. “Radioimmunoassays (RIAS).”Perkin Elmer.
2. Woodhead, J. S., Addison, g. M., Hales, c. N. (1974). Uji imunoradiometrik dan teknik terkait. British Medical Bulletin, 30 (1), 44-49. doi: 10.1093/OxfordJurnals.BMB.A071166
1. "Immunoassay" oleh Gringer - Own Work (CC0) via Commons Wikimedia