Apa perbedaan antara ragi satu hibrida dan ragi dua hibrida

Itu perbedaan utama Antara ragi satu hibrida dan ragi dua hibrida adalah ragi satu hibrida adalah sebuah in vitro uji berbasis untuk menganalisis interaksi DNA-protein sementara ragi dua hibrida adalah sebuah in vitro uji berbasis untuk menganalisis interaksi protein-protein.

Mempelajari interaksi antara molekul seluler dapat membantu mendefinisikan situs pengakuan yang terlibat dalam ekspresi gen dan jalur protein. Interaksi DNA dan protein merupakan bagian integral dari proses seluler seperti modifikasi DNA dan regulasi transkripsional, dll. Di sisi lain, interaksi protein dan protein memainkan peran vital dalam proses seluler seperti replikasi, transkripsi, terjemahan, dan transduksi sinyal. Oleh karena itu, sangat penting untuk mengidentifikasi interaksi molekul seluler ini melalui tes yang berbeda. Ragi satu hibrida dan ragi dua hibrida adalah dua in vitro Tes Berbasis untuk Menganalisis Interaksi DNA-Protein dan Protein-Protein.

ISI

1. Ikhtisar dan Perbedaan Utama
2. Apa itu ragi satu hibrida
3. Apa itu ragi dua hibrida
4. Kesamaan -ragi satu hibrida dan ragi dua hibrida
5. Ragi satu hibrida vs ragi dua hibrida dalam bentuk tabel
6. Ringkasan -ragi satu hibrida vs ragi dua hibrida

Apa itu ragi satu hibrida?

Ragi satu hibrida (y1h) adalah sebuah in vitro uji berbasis untuk menganalisis interaksi DNA-protein intraseluler. Metode ini pertama kali didirikan oleh Wang dan Reed pada tahun 1993. Sejak itu, ia telah menunjukkan kekuatan yang lebih besar dalam penelitian biologis. Dalam pengujian ini, ada dua komponen utama: umpan DNA dan Protein Preys.

Gambar 01: ragi satu hibrida

Dalam prosedur, urutan DNA (umpan DNA) pertama kali dikloning hulu dari dua reporter yang berbeda (HIS3, LACZ). Konstruksi reporter ini diintegrasikan ke dalam genom strain ragi. Faktor transkripsional diambil sebagai Protein Preys. Faktor transkripsi disatu dengan domain aktivasi transkripsi (AD) dari faktor transkripsi ragi gal4 untuk membuat protein hibrida. Seluruh protein hibrida ini diintegrasikan ke dalam plasmid sebelum memasukkannya ke dalam strain ragi. Setelah pengenalan plasmid rekombinan, ketika faktor transkripsi berinteraksi dengan fragmen DNA, gugus ad mengaktifkan ekspresi gen reporter (His3or LacZ). Sequencing Plasmid memungkinkan identifikasi faktor transkripsi yang dapat mengikat ke fragmen DNA. Baru -baru ini, ragi satu metode hibrida digunakan untuk meneliti diagnosis penyakit. Oleh karena itu, di masa depan, pengujian ini akan lebih banyak digunakan dalam penelitian ilmiah dan perawatan medis.

Apa itu ragi dua hibrida?

Ragi dua hibrida (y2h) adalah sebuah in vitro uji berbasis untuk menganalisis interaksi protein intraseluler dan protein. Metode ini awalnya ditemukan oleh Stanley Fields dan OK-Kyu Song pada tahun 1989. Teknik ini mendeteksi interaksi protein-protein menggunakan faktor transkripsi gal4 dari ragi.

Gambar 02: ragi dua hibrida

Dalam metode ini, dua fusi (hibrida) pertama kali dibangun menggunakan protein yang menarik: menggabungkan satu protein dengan domain pengikat DNA (DBD) dan dengan menggabungkan protein lain dengan domain aktivator (AD) dari faktor transkripsi GAL4. Protein yang menyatu dengan DBD dikenal sebagai umpan sementara, protein yang menyatu dengan AD dikenal sebagai mangsa. Dalam strain ragi, pada interaksi umpan dan mangsa, DBD dan AD dibawa dekat untuk menghasilkan faktor transkripsi gal4 fungsional di hulu gen reporter. Faktor transkripsi fungsional mengaktifkan ekspresi gen reporter. Selain itu, metode ini saat ini digunakan untuk menyaring interaksi protein membran integral dalam sel mamalia.

Apa kesamaan antara ragi satu hibrida dan ragi dua hibrida?

• Ragi satu hibrida dan ragi dua hibrida adalah dua in vitro Tes Berbasis untuk Menganalisis Interaksi DNA-Protein dan Protein-Protein.
• Tes ini menggunakan strain ragi.
• Kedua tes menggunakan domain aktivasi (AD) dari faktor transkripsi gal4.
• Mereka menggunakan ekspresi gen reporter (his3, atau lacz) untuk mendeteksi interaksi.
• Mereka memiliki umpan dan mangsa.
• Kedua pengujian sangat berguna dalam penelitian biologis modern.

Apa perbedaan antara ragi satu hibrida dan ragi dua hibrida?

Ragi satu hibrida adalah sebuah in vitro uji berbasis untuk menganalisis interaksi DNA dan protein sementara ragi dua hibrida adalah sebuah in vitro uji berdasarkan untuk menganalisis interaksi protein dan protein. Dengan demikian, ini adalah perbedaan utama antara ragi satu hibrida dan ragi dua hibrida. Selanjutnya, dalam ragi satu hibrida, umpan adalah fragmen DNA, dan mangsa adalah molekul protein. Di sisi lain, dalam ragi dua hibrida, baik umpan dan mangsa adalah molekul protein.

Infografis di bawah ini mencantumkan perbedaan antara ragi satu hibrida dan ragi dua hibrida dalam bentuk tabel untuk perbandingan berdampingan.

Ringkasan -ragi satu hibrida vs ragi dua hibrida

Ragi satu hibrida dan ragi dua hibrida adalah dua penting in vitro Tes Berbasis. Ragi satu hibrida adalah sebuah in vitro uji berbasis untuk menganalisis interaksi DNA dan protein sementara ragi dua hibrida adalah sebuah in vitro uji berdasarkan untuk menganalisis interaksi protein dan protein. Dengan demikian, ini adalah perbedaan utama antara ragi satu hibrida dan ragi dua hibrida.

Referensi:

1. Reece-Hoyes, John S, dan Albertha J M Walhout. “Tes One-Hybrid Ragi Berpusat Gen.”Metode dalam Biologi Molekuler (Clifton, N.J.), U.S. National Library of Medicine, 2012.
2. SHAFFER, DR. Catherine. “Aplikasi penyaringan dua-hibrida ragi.Berita, 26 Feb. 2019.

Gambar milik:

1. “Gambar 17 05 01” oleh CNX OpenStax - (CC oleh 4.0) Via Commons Wikimedia
2. "Two Hybrid Assay" oleh Anna - karya sendiri (CC BY -SA 3.0) Via Commons Wikimedia