Perbedaan antara HPLC dan HPTLC
Perbedaan utama - HPLC vs HPTLC
Perbedaan utama antara HPLC dan HPTLC adalah itu HPLC memungkinkan pemisahan kuantitatif komponen dalam sampel sedangkan HPTLC tidak memungkinkan pemisahan kuantitatif komponen dalam sampel.
Kromatografi adalah metode pemisahan fisik yang digunakan untuk memisahkan dan mengidentifikasi komponen dalam campuran. Baik HPLC dan HPTLC adalah teknik kromatografi. HPLC adalah kromatografi cair berkinerja tinggi. HPTLC adalah kromatografi lapisan tipis berkinerja tinggi.
ISI
1. Ikhtisar dan Perbedaan Utama
2. Apa itu HPLC
3. Apa itu HPTLC
4. Perbandingan berdampingan - HPLC vs HPTLC dalam bentuk tabel
5. Ringkasan
Apa itu HPLC?
HPLC adalah Kromatografi cair kinerja tinggi. Ini adalah teknik analitik yang digunakan untuk memisahkan, mengidentifikasi, dan mengukur komponen dalam campuran. Dalam teknik ini, sampel dilarutkan dalam pelarut yang sesuai. Kemudian pelarut dengan sampel dilewatkan melalui pompa dengan tekanan yang diberikan. Pompa diisi dengan bahan adsorben padat. Kemudian beberapa komponen sangat mengikat bahan penyerap sedangkan komponen lain mengikat secara longgar. Ini menyebabkan komponen memiliki laju aliran yang berbeda melalui pompa. Oleh karena itu, komponen dapat dipisahkan dengan mudah.
Gambar 01: Sistem HPLC
Bahan adsorben yang mengisi pompa dikenal sebagai fase stasioner. Pelarut dengan sampel terlarut dikenal sebagai fase gerak. Pompa yang digunakan dalam teknik ini disebut kolom. Kolom diisi dengan bahan adsorben, paling umum, partikel silika. Ukuran partikel ini dapat berkisar dari 2-50 μm. Proses pemisahan dipengaruhi oleh komposisi fase gerak dan suhu sistem. Interaksi antara fase diam dan komponen dalam sampel dapat berupa interaksi hidrofobik, interaksi dipol-dipol, ikatan ionik, dll.
Tekanan operasi HPLC jauh lebih tinggi daripada kromatografi cair tradisional. Itu terletak sekitar 50-350 bar. Perbedaan antara kromatografi cair dan HPLC adalah bahwa dalam kromatografi cair, sampel jatuh melalui kolom di bawah gravitasi sedangkan, dalam HPLC, sampel ditekan melalui kolom. Ukuran kolom dan partikel penyerap juga sangat kecil jika dibandingkan dengan kromatografi cair tradisional. Namun, resolusi yang diberikan oleh teknik HPLC lebih unggul.
Apa itu HPTLC?
HPTLC adalah kromatografi lapisan tipis berkinerja tinggi. Ini adalah bentuk TLC tradisional yang canggih dan otomatis. Teknik ini memberikan resolusi yang efisien dalam waktu singkat. Dalam metode analisis ini, sampel dan referensi dapat dianalisis pada saat yang sama, yang memungkinkan sampel dibandingkan dengan referensi. Ini memberikan akurasi analitik yang lebih baik daripada teknik kromatografi lainnya. Waktu yang dibutuhkan untuk analisis lebih sedikit. Tekniknya adalah teknik berbiaya rendah.
Gambar 02: Analisis pewarna makanan menggunakan HPTLC
Metode HPTLC adalah proses sederhana, dan langkah persiapan sampel juga dihilangkan (dalam TLC tradisional, langkah persiapan sampel termasuk sebelum pemisahan. Langkah ini melibatkan pembersihan dan pengayaan). Pelarut dapat digunakan secara langsung tanpa pra-perawatan meskipun teknik kromatografi lainnya memerlukan pra-perawatan seperti degassing, filtrasi, dll.
Bahan adsorben yang digunakan dalam HPTLC adalah silika dengan ukuran partikel yang sangat kecil. Dalam TLC tradisional, ukuran partikel silika adalah 5-20 μm sedangkan, di HPTLC, 4-8 μm itu adalah 4-8 μm. Sampel diterapkan pada pelat HPTLC menggunakan aplikator. Ini memberikan aplikasi yang seragam dan aman. Kemudian pelat ditempatkan di ruang yang memiliki fase gerak. Ruang harus jenuh dengan uap fase gerak. Setelah proses HPTLC, bintik -bintik yang telah dipindahkan dapat dideteksi. Saat mendeteksi bintik -bintik di atas piring, teknik HPTLC menggunakan wilayah UV yang sesuai atau ruang yodium.
Apa perbedaan antara HPLC dan HPTLC?
HPLC vs HPTLC | |
| HPLC adalah kromatografi cair berkinerja tinggi. | HPTLC adalah kromatografi lapisan tipis berkinerja tinggi. |
| Teknik | |
| Di HPLC, fase gerak dengan pelarut dilewatkan melalui kolom yang diisi dengan fase stasioner. | Di HPTLC, sampel terlihat pada pelat TLC dan ditempatkan di dalam ruang yang berisi fase gerak; Kemudian sampel dibiarkan bermigrasi ke atas pelat bersama dengan fase gerak. |
| Pengukuran | |
| Dalam HPLC, perbedaan antara laju aliran komponen melalui kolom digunakan untuk memisahkan komponen dalam sampel. | Dalam HPTLC, perbedaan antara jarak yang ditempuh oleh masing -masing komponen dalam sampel digunakan untuk memisahkan komponen dalam sampel. |
| Pemisahan kuantitatif | |
| HPLC memungkinkan pemisahan kuantitatif komponen dalam sampel. | HPTLC tidak memungkinkan pemisahan kuantitatif komponen dalam sampel. |
Ringkasan -HPLC vs HPTLC
HPLC dan HPTLC adalah dua teknik kromatografi. Perbedaan utama antara HPLC dan HPTLC adalah bahwa HPLC memungkinkan pemisahan kuantitatif komponen dalam sampel sedangkan HPTLC tidak memungkinkan pemisahan kuantitatif komponen dalam sampel.
Referensi:
1. “Kromatografi cair berkinerja tinggi.”Wikipedia, Wikimedia Foundation, 10 Apr. 2018, tersedia di sini.
2. “Hptlc.”LinkedIn Slideshare, 30 Mei 2011, tersedia di sini.
Gambar milik:
1. "HptlcplateToms" oleh Kjaergaard di Inggris Wikipedia - ditransfer dari EN.Wikipedia ke Commons (domain publik) melalui Commons Wikimedia
2. "HPLC" oleh PD DR. rer. nat. keabadian. Gertrud Morlockassociate Profesor (Privatdozentin) Universitas Hohenheiminstitute of Food Chemistry - G. Morlock, c. Oellig, Layanan Bibliografi Camag 103 (2009) via Commons Wikimedia
